鹽敏感性高血壓家系血管緊張素Ⅱ-2型受體(A1675G)基因多態(tài)性研究.pdf

1、背景:原發(fā)性高血壓(EssentialHypertension，EH)是威脅人類健康的重要疾病之一，也是引起其它多種疾病，特別是心腦血管疾病的主要危險(xiǎn)因素之一，它是一種由遺傳因素和環(huán)境因素共同作用所致的常見心血管疾病，嚴(yán)重危害著人類健康。近年來，人們一直致力于探索高血壓的發(fā)病機(jī)制，然而到目前仍無明確定論。大量流行病學(xué)資料和實(shí)驗(yàn)研究顯示高血壓是在一定的遺傳改變基礎(chǔ)上，由于多種環(huán)境因素的相互作用導(dǎo)致正常血壓的調(diào)節(jié)機(jī)制失衡所引起。
　　

2、 在影響高血壓的多種環(huán)境因素中，鹽始終被認(rèn)為與高血壓的發(fā)生與發(fā)展密切相關(guān)，正確識(shí)別鹽敏感基因，對(duì)全面闡明高血壓的發(fā)生機(jī)制至關(guān)重要。腎素.血管緊張素.醛固酮系統(tǒng)(reninangiotensinaldosteronesystem，RAAS)是人體參與調(diào)節(jié)血壓和體液平衡的重要系統(tǒng)，與高血壓發(fā)病密切相關(guān)。血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)是RAAS的主要效應(yīng)物質(zhì)，通過與AngⅡ受體結(jié)合使小動(dòng)脈平滑肌收縮，刺激腎上腺皮質(zhì)球狀帶分泌醛固酮，通過交感神經(jīng)末

3、梢突觸前膜的正反饋使腎上腺素分泌增多，使血壓升高，參與高血壓的發(fā)病及維持。血管緊張素Ⅱ-2型受體(AT2R)A1675G基因多態(tài)性是否與高血壓的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，目前結(jié)論不統(tǒng)一。確定該基因是否為鹽敏感性高血壓的易感基因，將為進(jìn)一步進(jìn)行EH基因治療研究和有針對(duì)性地防治高血壓的發(fā)生發(fā)展提供理論依據(jù)。
　　 目的:1.探討鈉、鉀攝入量的變化對(duì)鹽敏感性高血壓發(fā)生發(fā)展的影響，并探討鹽敏感性高血壓的家庭聚集性。
　　 2.探討鹽敏感性高

4、血壓家系與AT2RA1675G基因多態(tài)性之間的相關(guān)性以及鹽敏感性高血壓患者家系中AT2RA1675G基因多態(tài)性頻率分布特點(diǎn)。
　　 方法:以村為基礎(chǔ)，以家系為單位，選擇在當(dāng)?shù)鼐幼?年以上的漢族人為受試對(duì)象，根據(jù)先證者入選標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)，共合格入選先證者115例;根據(jù)先證者同胞/子女的入選標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)，共合格入選同胞/子女269例;共384例參加者，男193例，女191例，高血壓患者206例，血壓正常者178例，平均年齡35.3

5、±12.7歲。所有參加者均提供了知情同意書。采用慢性鹽負(fù)荷試驗(yàn)，按Sullivan推薦的鹽敏感標(biāo)準(zhǔn)，高鹽飲食期平均血壓較平穩(wěn)飲食期增幅＞5mmHg和(或)與低鹽飲食期平均血壓減幅≥lOmmHg者判定為鹽敏感;未逾此值者為鹽不敏感。所有入選的家系按飲食干預(yù)后血壓的變化情況分為鹽敏感性(saltsensitity，SS)高血壓家系和鹽不敏感性(non-saltsensitive，NSS)高血壓家系。在基線期測(cè)量所有參加者的血壓、身高、體重和

6、腰圍;收集空腹血標(biāo)本，收集參加者第1天24小時(shí)尿標(biāo)本、第2天和第3天的夜尿標(biāo)本。在每個(gè)飲食干預(yù)階段，對(duì)所有參加者進(jìn)行例體測(cè)量、血壓測(cè)量，收集每個(gè)干預(yù)階段第5天24小時(shí)尿標(biāo)本、第6和第7天夜間尿標(biāo)本、第6天的外周靜脈空腹血標(biāo)本，同時(shí)監(jiān)測(cè)尿鈉、尿鉀、血脂、血糖、血生化的變化。抽提DNA進(jìn)行AT2RA1675G基因多態(tài)性分析。應(yīng)用低滲溶血.鹽析法抽提所有入選受試者的全血DNA，采用PCR技術(shù)擴(kuò)增提取的DNA，引物上游序列5’-ATTACGTC

7、CCAGCGTCTGAGC-3’，下游序列5’-ATAAATCAGCTTGCTTAGTGC-3’。應(yīng)用12％聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行電泳，對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物測(cè)序分析AT2RA1675G基因多態(tài)性。基因型和等位基因頻率用基因計(jì)數(shù)法，等位基因頻率比較及檢驗(yàn)基因型頻率，均用x2檢驗(yàn)。組間一般資料及生化指標(biāo)的比較采用單因素方差分析、t檢驗(yàn)或x2檢驗(yàn)及相關(guān)分析等。所有計(jì)量資料均采用x-±s表示，計(jì)數(shù)資料用百分?jǐn)?shù)表示。所有統(tǒng)計(jì)資料應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件分析

8、。
　　 結(jié)果:飲食干預(yù)后，鹽敏感者170例，占44.3％，男87例，女83例;鹽不敏感者214例，占55.7％，男106例，女108例。先證者中鹽敏感者62例，占53.g％，男32例，女30例。鹽敏感性先證者的同胞/子女中鹽敏感者69例，占47.6％，鹽不敏感性先證者的同胞/子女中鹽敏感者39例，占31.5％，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。鹽敏感者和鹽不敏感者一般資料及生化指標(biāo)無顯著性差異(P＞0.05)。在低鹽飲

9、食期，鹽敏感者的收縮壓、平均動(dòng)脈壓下降，與鹽不敏感者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在高鹽飲食期，鹽敏感者的收縮壓、平均動(dòng)脈壓上升，與鹽不敏感者比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在高鹽飲食期、高鹽補(bǔ)鉀飲食期，鹽敏感者頸.橈脈搏波傳導(dǎo)速度(crPWV)明顯高于鹽不敏感者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 鹽敏感者AT2R基因A1675G多態(tài)性以AA型為主，G等位基因較少。鹽敏感者AA型91例，占53.5％，

10、AG型28例，占16.5％，GG型51例，占30.0％，A等位基因頻率為61.8％，G等位基因頻率為38.2％;鹽不敏感者AA型82例，占38.3％，AG型26例，占12.2％，GG型106例，占49.5％，A等位基因頻率為44.4％，G等位基因頻率為55.6％。鹽敏感者AA基因型頻率、A等位基因頻率明顯高于鹽不敏感者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。鹽敏感先證者同胞/子女AA型76例，占52.4％，AG型26例，占17.g％，GG型

11、43例，占29.7％，A等位基因頻率為61.4％，G等位基因頻率為38.6％;鹽不敏感先證者同胞/子女AA型36例，占29.0％，AG型16例，占12.g％，GG型72例，占58.1％，A等位基因頻率為35.5％，G等位基因頻率為64.5％。鹽敏感先證者同胞/子女AA基因型頻率、A等位基因頻率明顯高于鹽不敏感者同胞/子女，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在高鹽飲食期、高鹽補(bǔ)鉀飲食期，鹽敏感AA基因型者crPWV均明顯高于鹽敏感GG基因

12、型者，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在低鹽飲食期，鹽敏感者AA型的AT2R表達(dá)濃度明顯高于鹽不敏感者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在高鹽飲食期，鹽敏感者AA型、AG型、GG型AT2R表達(dá)濃度均低于鹽不敏感者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。鹽敏感AA基因型者的crPWV與AT2R表達(dá)濃度呈負(fù)相關(guān)。
　　 結(jié)論:
　　 1.鹽是EH發(fā)生發(fā)展的重要環(huán)境因素之一。在低鹽飲食干預(yù)期，鹽敏感者血壓明顯下降;在高鹽飲食

13、干預(yù)期，血壓明顯上升。通過檢測(cè)高血壓患者的鹽敏感性有利于高血壓的防治。
　　 2.鹽敏感性高血壓患者具有明顯的家族聚集性，遺傳因素AT2R1675A/G基因與環(huán)境因素鹽在鹽敏感性高血壓的發(fā)生發(fā)展中均起重要作用。
　　 3.鹽敏感性高血壓患者RAAS系統(tǒng)存在異常，在受到高鹽刺激時(shí)，AT2R表達(dá)減少，血壓明顯升高。
　　 4.AT2RA1675基因多態(tài)性與鹽敏感性高血壓具有相關(guān)性。在鹽敏感性高血壓患者家系中，AT2R