小麥胚芽蛋白質譜識別及釋放行為研究.pdf

1、小麥胚芽蛋白是以脫脂小麥胚芽為原料經過堿溶酸沉等方式制備而成的蛋白質產品，在食品、化工等領域具有重要的應用前景。傳統(tǒng)的基于堿溶酸沉技術的提取工藝存在用水量高、提取率低和乳清廢水排放量大等一系列問題。此外，資源利用率和產品附加值較低。本文旨在以麥粕中蛋白質為研究對象研究一種新型的堿溶酸沉提取小麥胚芽蛋白的方法，并在基于質譜的蛋白質種類識別的基礎上，研究了不同的提取條件對小麥胚芽中各種種類的蛋白質的釋放行為造成的不同影響。通過小麥胚芽中試放

2、大實驗可將所得產品應用到實際生產中，并通過改變提取溫度、溶劑的pH值及提取時間等因素可進一步提高蛋白得率及蛋白含量，主要結論如下：
　　1.基于HPLC-MS的蛋白質識別方法研究，利用HPLC對小麥胚芽蛋白提取液進行了分離，收集了分離出的主要蛋白質組分，采用不同的蛋白酶進行酶解的技術并結合了高效液相色譜串聯(lián)質譜技術對高效液相分離出各種種類的蛋白質進行了一一識別。結果表明不同種類蛋白質在色譜柱中保留時間的不同，總計識別出多種蛋白質，

3、其中豐度較高的蛋白質有17種。
　　2.脫脂小麥胚芽蛋白質釋放行為研究，在蛋白質組分識別的基礎上，對麥粕中每一種蛋白質的溶出過程進行了檢測，并對比了所有種類的蛋白質在提取過程中的釋放速率以及釋放量的顯著變化。根據實驗的結果可知，低分子量的蛋白釋放速率顯著快于高分子量蛋白質的釋放速率，而且動態(tài)提取的過程要比靜態(tài)提取的過程各組分蛋白的釋放速率要高很多，動態(tài)提取過程中保留時間為18.78min的色譜峰中Chromosome3B蛋白釋放速

4、率最快，提取2次的蛋白釋放率已達90％。
　　3.基于小麥胚芽蛋白的酶解方法研究，考察了利用各種蛋白酶在不同的固液比、提取溫度、溶液pH值的條件下水解脫脂小麥胚芽蛋白制備得到小麥胚芽肽。比較木瓜蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶,以及混合蛋白酶水解脫脂小麥胚芽蛋白的進程曲線，結果顯示復合蛋白酶的酶解效果最好，其較佳作用條件為：底物濃度11.11%，pH7.0，溫度45℃，酶與底物比1:200，時間為60 min。在此條件下，小麥胚芽蛋白的酶解