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文檔簡介
1、一、光學顯微鏡的基本構造及功能一、光學顯微鏡的基本構造及功能(一)機械部分(一)機械部分1、鏡筒:、鏡筒:為安裝在光鏡最上方或鏡臂前方的圓筒狀結構,其上端裝有目鏡,下端與物鏡轉換器相連。根據鏡筒的數目,光鏡可分為單筒式或雙筒式兩類。單筒光鏡又分為直立式和傾斜式兩種。而雙筒式光鏡的鏡筒均為傾斜的。鏡筒直立式光鏡的目鏡與物鏡的中心線互成45度角,在其鏡筒中裝有能使光線折轉45度的棱鏡。2、物鏡轉換器:、物鏡轉換器:又稱物鏡轉換盤。是安裝在鏡
2、筒下方的一圓盤狀構造,可以按順時針或反時針方向自由旋轉。其上均勻分布有3~4個圓孔,用以裝載不同放大倍數的物鏡。轉動物鏡轉換盤可使不同的物鏡到達工作位置(即與光路合軸)。使用時注意憑手感使所需物鏡準確到位。3、鏡臂:、鏡臂:為支持鏡筒和鏡臺的彎曲狀構造,是取用顯微鏡時握拿的部位。鏡筒直立式光鏡在鏡臂與其下方的鏡柱之間有一傾斜關節(jié),可使鏡筒向后傾斜一定角度以方便觀察,但使用時傾斜角度不應超過45度,否則顯微鏡則由于重心偏移容易翻倒。在使用
3、臨時裝片時,千萬不要傾斜鏡臂,以免液體或染液流出,污染顯微鏡。4、調焦器:、調焦器:也稱調焦螺旋,為調節(jié)焦距的裝置,位于鏡臂的上端(鏡筒直立式光鏡)或下端(鏡筒傾斜式光鏡),分粗調螺旋(大螺旋)和細調螺旋(小螺旋)兩種。粗調螺旋可使鏡筒或載物臺以較快速度或較大幅度的升降,能迅速調節(jié)好焦距使物像呈現在視野中,適于低倍鏡觀察時的調焦。而細調螺旋只能使鏡筒或載物臺緩慢或較小幅度的升降(升或降的距離不易被肉眼觀察到),適用于高倍鏡和油鏡的聚焦或
4、觀察標本的不同層次,一般在粗調螺旋調焦的基礎上再使用細調焦螺旋,精細調節(jié)焦距。有些類型的光鏡,粗調螺旋和細調螺旋重合在一起,安裝在鏡柱的兩側。左右側粗調螺旋的內側有一窄環(huán),稱為粗調松緊調節(jié)輪,其功能是調節(jié)粗調螺旋的松緊度(向外轉偏松,向內轉偏緊)。另外,在左側粗調螺旋的內側有一粗調限位環(huán)凸柄,當用粗調螺旋調準焦距后向上推緊該柄,可使粗調螺旋限位,此時鏡臺不能繼續(xù)上升但細調旋仍可調節(jié)。5、載物臺:、載物臺:也稱鏡臺,是位于物鏡轉換器下方的
5、方形平臺,是放置被觀察的玻片標本的地方。平臺的中央有一圓孔,稱為通光孔,來自下方光線經此孔照射到標本上。在載物臺上通常裝有標本移動器(也稱標本推進器),移動器上安裝的彈簧夾可用于固定玻片標本,另外,轉動與移動器相連的兩個螺旋可使玻片標本前后左右地移動,這樣尋找物像時較為方便。在標本移動器上一般還附有縱橫游標尺,可以計算標本移動的距離和確定標本的位置。游標尺一般由主標尺(A)和副標尺(B)組成。副標尺的分度為主標尺的9/10。使用時先看到
6、標尺的0點位置,再看主副標尺刻度線的重合點即可讀出準確的數值6、鏡柱、鏡柱:為鏡臂與鏡座相連的短柱。7、鏡座:、鏡座:位于顯微鏡最底部的構造,為整個顯微鏡的基座,用于支持和穩(wěn)定鏡體。有的顯微鏡在鏡座內裝有照明光源等構造。(二)光學系統部分(二)光學系統部分光鏡的光學系統主要包括物鏡、目鏡和照明裝置(反光鏡、聚光器和光圈等)。1、目鏡:、目鏡:又稱接目鏡,安裝在鏡筒的上端,起著將物鏡所放大的物像進一步放大的作用。每個目鏡一般由兩個透鏡組成
7、,在上下兩透鏡(即接目透鏡和會聚透鏡)之間安裝有能決定視野大小的金屬光闌——視場光闌,此光闌的位置即是物鏡所放大實像的位置,故可將一小段頭發(fā)粘附在光闌上作為指針,用以指示視野中的某一部分供他人觀察。另外,還可在光闌的上面安裝目鏡測微尺。每臺顯微鏡通常配置2~3個不同放大倍率的目鏡,常見的有5、10和15(表示放大倍數)的目鏡,可根據不同的需要選擇使用,最常使用的是10目鏡。2、物鏡:、物鏡:也稱接物鏡,安裝在物鏡轉換器上。每臺光鏡一般有
8、3~4之個不同放大倍率的物鏡,每個物鏡由數片凸透鏡和凹透鏡組合而成,是顯微鏡最主要的光學部件,決定著光鏡分辨力的高低。常用物鏡的放大倍數有10、40和100等幾種。一般將8或10的物鏡稱為低倍鏡(而將5以下的叫做放大鏡);將40或45的稱為高倍鏡;將90或100的稱為油鏡(這種鏡頭在使用時需浸在鏡油中)。在每個物鏡上通常都刻有能反映其主要性能的參數,主要有放大倍數和數值孔徑(如10/025、40/0.65和100/1.25),該物鏡所要
9、求的鏡筒長度和標本上的蓋玻片厚度(160/0.17,單位mm)等,另外,在油鏡上還常標有“油”或“Oil”的字樣。油鏡在使用時需要用香柏油或石蠟油作為介質,這是因為油鏡的透鏡和鏡孔較小,而光線要通過載玻片和空氣才能進入物鏡中,玻璃與空氣的折光率不同,使部分光線產生折射而損失掉,導致進入物鏡的光線減少,而使視野暗淡,物像不清。在玻片標本和油鏡之間填充折射率與玻璃近似的香柏油或石蠟油時(玻璃、香柏油和石蠟油的折射率分別為1.52、1.51、
10、1.46,空氣為1),可減少光線的折射,增加視野亮度,提高分辨率。物鏡分辨力的大小取決于物鏡的數值孔徑(numerialapertureN.A.),N.A.又稱為鏡口率,其數值越大,則表示分辨力越高。C線為蓋玻片的的上表面,10?物鏡的工作距離為7.63mm;40?物鏡的工作距離為0.198mm;100.25、400.65、1001.25表示鏡頭的放大倍數和數字孔徑。1600.17表示顯微鏡的機械鏡筒長度(標本至目鏡的距離)和蓋玻片的厚
11、度。即鏡筒長度為160mm,蓋玻片厚度為0.17mm。不同的物鏡有不同的工作距離。所謂工作距離是指顯微鏡處于工作狀態(tài)(焦距調好、物像清晰)時,物鏡最下端與蓋玻片上表面之間的距離。物鏡的放大倍數與其工作距離成反比。當低倍鏡被調節(jié)到工作距離后,可直接轉換高倍鏡或油鏡,只需要用細調螺旋稍加調節(jié)焦距便可見到清晰的物像,這種情況稱為同高調焦。不同放大倍數的物鏡也可從外形上加以區(qū)別,一般來說,物鏡的長度與放大倍數成正比,低倍鏡最短,油鏡最長,而高倍
12、鏡的長度介于兩者之間。3、聚光器:、聚光器:位于載物臺的通光孔的下方,由聚光鏡和光圈構成,其主要功能是光線集中到所要觀察的標本上。聚光鏡由2~3個透鏡組合而成,其作用相當于一個凸透鏡,可將光線匯集成束。在聚光器的左下方有一調節(jié)螺旋可使其上升或下降,從而調節(jié)光線的強弱,升高聚光器可使光線增強,反之則光線變弱。光圈也稱為彩虹闌或孔徑光闌,位于聚光器的下端,是一種能控制進入聚光器的光束大小的可變光闌。它由十幾張金屬薄片組合排列而成,其外側有一
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