受熱應(yīng)激胎鼠組織熱休克蛋白70表達及氧化損傷的研究.pdf

1、將受孕8d的昆明雌性小白鼠分為常溫(20℃)對照組、37℃誘導(dǎo)組(1h+42℃15min)和39℃誘導(dǎo)組(1h+42℃15min)和42℃處理組(15min)四個溫度組，按照上述模式建立全身熱應(yīng)激動物模型。持續(xù)熱應(yīng)激3d，將每組一部分孕鼠用脫頸法處死取胎鼠;應(yīng)用Western blot技術(shù)檢測胎鼠組織中熱休克蛋白70(Hsp70)的表達;應(yīng)用形態(tài)學(xué)觀察法，研究受試胎鼠組織形態(tài)學(xué)和骨骼結(jié)構(gòu)的變化;應(yīng)用比色法檢測胎鼠組織內(nèi)丙二醛(MDA)、

2、抗氧化物酶(SOD、GSH-Px)的濃度或活力的變化。剩余部分孕鼠繼續(xù)飼養(yǎng)，在妊娠18d時脫頸法處死，記錄孕鼠體重、產(chǎn)仔數(shù)，觀察胎鼠形態(tài)并記錄其體重、身長、尾長的變化。以研究不同強度熱應(yīng)激對胎鼠組織發(fā)育形態(tài)的影響，熱應(yīng)激誘導(dǎo)對胎鼠Hsp70表達量的影響及胎鼠熱耐受性獲得與Hsp70表達之間的關(guān)系。試驗結(jié)果如下:
　　 1.熱應(yīng)激胎鼠發(fā)育能力比較
　　 37℃預(yù)熱應(yīng)激組胎鼠體重、身長和尾長分別為1.42g、23.4mm和1

3、0.8mm;39℃預(yù)熱應(yīng)激組胎鼠體重、身長和尾長分別為1.41g、23.2mm和10.9mm;42℃熱應(yīng)激組胎鼠體重、身長和尾長分別為1.30g、22.0mm和10.2mm;對照為1.53g、24.9mm和11.2mm;42℃組胎鼠上述指標(biāo)與對照組相比顯著降低(P＜0.05)，其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。39℃處理組胎鼠畸形率為8.3％、42℃處理組胎鼠死亡率為17.1％，這比對照組(均為0％)極顯著升高(P＜0.01)，39

4、℃和42℃處理組吸收胎鼠率（分別為9.5％，7.9％）與對照組(1.6％)相比顯著升高(P＜0.05)，其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。
　　 2.熱應(yīng)激胎鼠發(fā)育形態(tài)學(xué)變化
　　 經(jīng)不同強度熱應(yīng)激處理組的妊娠鼠，其胎鼠發(fā)生骨胳畸形，胸骨、肋骨數(shù)目減少，骨化不完全，區(qū)域縮小;在光鏡下觀察試驗組與對照組胎鼠的細(xì)胞、組織均無明顯形態(tài)學(xué)變化。
　　 3.不同強度熱應(yīng)激預(yù)處理胎鼠組織Hsp70的表達
　　 經(jīng)

5、Western blot檢測，37℃、39℃預(yù)熱應(yīng)激組和42℃高溫處理組胎鼠組織Hsp70表達量分別為0.722、0.846和0.782，而對照組為0.659;39℃預(yù)熱應(yīng)激處理組胎鼠組織Hsp70表達量極顯著(P＜0.01)高于對照組，其它2組顯著(P＜0.05)高于對照組。
　　 4.熱應(yīng)激胎鼠組織中SOD、GSH-Px活力和MDA濃度的影響
　　 37℃、39℃預(yù)熱應(yīng)激組和42℃高溫處理組胎鼠組織中MDA濃度分別為

6、3.95nmol/mg、5.01nmol/mg和16.67nmol/mg，對照組為5.17nmol/mg，42℃熱應(yīng)激組極顯著(P＜0.01)高于對照組;其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。
　　 37℃預(yù)熱應(yīng)激組胎鼠組織中SOD、GSH-Px活力分別為71.04nmol/mg、65.52nmol/mg，39℃預(yù)熱應(yīng)激組分別為62.62nmol/mg、67.84nmol/mg，42℃熱應(yīng)激組分別為44.07nmol/mg、45