1772.基于識別引發(fā)dna構型變化的比例電化學檢測新方法研究

1、分類號0657.1單位代碼10447密級無學號1410120213碩士學位論文基于識別引發(fā)基于識別引發(fā)DNADNA構型變化的比例構型變化的比例電化學檢測新方法研究電化學檢測新方法研究StudyonNovelMethodsBasedonTargetInducedRatiometricElectrochemicalDetection作者姓名王蘭蘭王蘭蘭專業(yè)名稱分析化學分析化學指導教師姓名王懷生王懷生教授教授學院化學化工學院化學化工學院論文提

2、交日期20172017年6月聊城大學碩士學位論文i摘要伴隨著科學技術的發(fā)展，蛋白質、DNA以及金屬離子等生命相關物質的檢測在臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測、食品安全等領域的應用日益廣泛，而傳統(tǒng)的檢測方法往往靈敏度較低，因此，發(fā)展更多的新技術和新方法對于實現(xiàn)目標分析物的快速高靈敏檢測至關重要。本論文將適配體的特異性識別、金屬DNA酶的親合作用、酶輔助循環(huán)放大及生物條形碼納米探針放大與傳統(tǒng)電分析方法相結合，引入“一對雙”的信號輸出模式，發(fā)展了一系列新型

3、比例電化學傳感器，用于核酸、蛋白質等生物大分子以及鉛離子的靈敏檢測，有效克服了傳統(tǒng)單信號電化學傳感器“假陽性”或“假陰性”的缺點，大大提高了分析檢測的特異性及重復性。主要包括以下三個部分：1、基于靶誘導耦合生物條形碼納米放大技術的凝血酶比例電化學傳感器、基于靶誘導耦合生物條形碼納米放大技術的凝血酶比例電化學傳感器基于“信號擴增”和“信號衰減”同時發(fā)生策略，構建了用于凝血酶靈敏檢測的新型比例電化學適體傳感器，通過二茂鐵標記的發(fā)卡探針（Fc

4、HP）、凝血酶適配體、亞甲基藍標記的生物條形碼納米金（MBP3AuNPs）層層自組裝實現(xiàn)傳感平臺的構建。該方法結合了適配體識別特性、生物條形碼納米探針擴增能力及雙信號同時輸出策略，實現(xiàn)了凝血酶的靈敏檢測，其檢測范圍為0.00330nM，檢出限低至1.1pM(SN=3)，并且具有良好的選擇性，穩(wěn)定性和重現(xiàn)性。另外，本實驗也為建立一種普適性的比例電化學分析方法提供了新的思路，如果改變識別探針，可將該傳感器用于其它目標分子的檢測，該傳感器有望

5、應用于疾病診斷、生物分析領域。2、基于特異性、基于特異性DNA酶檢測酶檢測Pb2的比例電化學傳感器的比例電化學傳感器基于特異性DNA酶構建了靈敏的Pb2比例電化學傳感器。該傳感器主要利用“817”DNA酶的高特異性和選擇性，它能夠特異性的識別Pb2，通過在電極表面雜交具有Pb2識別位點的亞甲基藍標記探針（MBP1）及二茂鐵標記探針（FcP2）實現(xiàn)傳感平臺的構建。Pb2的出現(xiàn)會激活DNA酶并催化裂解底物鏈，進而引發(fā)電極表面的DNA構象發(fā)生