基于DNA自組裝的納米金比色檢測DNA新方法研究.pdf

1、DNA是生物體重要的遺傳物質，通過對DNA的檢測能實現對疾病的早期診斷和預防，不同物種的鑒定和環(huán)境的監(jiān)測保護等，因此，對DNA的檢測具有十分重要的意義。本論文以DNA檢測為主要目標，從DNA無酶自組裝信號放大出發(fā)，提出了一種新型無酶的指數式發(fā)卡型DNA自組裝反應，并研究通過多種方式將該反應應用于DNA檢測中。
　　首先，在雜交鏈式反應的基礎上，本論文提出了一種新型的指數式發(fā)卡自組裝反應，該反應只需要四條發(fā)卡型DNA，加入引發(fā)鏈之后

2、，在自由能的驅動下自發(fā)進行組裝，在較短的時間內生成一個較大的DNA聚合體。通過瓊脂糖凝膠電泳驗證了該反應的可行性;通過原子力顯微鏡進一步表征了生成產物的形態(tài)。在優(yōu)化發(fā)卡型DNA的濃度和反應時間后，形成了規(guī)則的納米微孔網狀結構，孔徑分布在200nm到400nm之間。該納米微孔網狀結構可以作為一種新型的DNA納米材料。
　　其次，以該納米材料作為信號放大的載體，結合熒光成像單分子檢測技術和納米金比色檢測技術，將該反應應用于DNA的檢測

3、中。實驗結果顯示納米金比色檢測技術能有效的消除背景信號的影響，實現對DNA的靈敏檢測。在最佳反應條件下，靶標濃度在25-10000pM之間時，比色檢測結果成良好的線性關系，該檢測方法能在15 min內實現肉眼檢測25 pM的靶標DNA，該檢測限比傳統(tǒng)的納米金比色檢測方法降低了約400倍，同時通過紫外可見光分光光度計可檢測11.2pM的靶標DNA。另外，通過對不同錯配靶標的檢測，證明了該方法對單堿基突變具有良好的特異性。
　　本論文