人參皂苷Rb1抗AngⅡ致心肌細胞肥大的效應(yīng)及機制探討.pdf

1、目的：研究人參皂苷Rb1對血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)誘導(dǎo)的體外培養(yǎng)SD乳鼠心肌細胞肥大的藥物效應(yīng)及其作用機制。 方法：體外培養(yǎng)的SD乳鼠心肌細胞3天后，根據(jù)實驗需要隨機分成正常對照組、模型組、陽性對照藥精氨酸(L-arg1×10-3mol·L-1)組、Rb1高劑量(200μg·ml-1)組、Rb1中劑量(100μg·ml-1)組和Rb1低劑量(50μg·ml-1)組，為了觀察Rb1抗心肌肥大作用是否與NO釋放有關(guān)，我們在另一個Rb

2、1高劑量加入NO合酶抑制劑L-NAME,即Rb1高劑量(200μg·ml-1)+L-NAME(1×10-3mol·L-1)組。除正常對照組外，其余各組均加入1×10-7mol·L-1的AngⅡ誘導(dǎo)心肌肥大，并同時根據(jù)組別不同加入相應(yīng)劑量的受試藥，繼續(xù)培養(yǎng)2天，用于相應(yīng)指標(biāo)檢測：以HE染色觀察細胞肥大情況并用BI2000圖像分析系統(tǒng)測量細胞直徑、用Bradford蛋白濃度測定試劑盒檢測蛋白含量、采用RT-PCR方法觀察ANFmRNA的表達

3、等作為心肌肥大指標(biāo)；然后利用Ca2+熒光指示劑Fura-2/AM負載心肌細胞檢測細胞內(nèi)游離Ca2+濃度([Ca2+]i)變化、采用RT-PCR方法觀察CaNmRNA的表達以探討人參皂苷Rb1抑制心肌肥大的可能機制。 結(jié)果：1×10-7mol·L-1AngⅡ具有明顯的誘導(dǎo)心肌細胞肥大的作用：模型組細胞直徑和蛋白含量明顯增大(P＜0.001)；HE染色可見心肌細胞腫脹，體積增大、ANFmRNA表達明顯上調(diào)(P＜0.001)；細胞[C

4、a2+]i明顯升高(P＜0.001)；CaNmRNA表達明顯增強。Rb150、100和200μg·ml-1呈劑量依賴性地抑制AngⅡ10-7mol·L-1誘導(dǎo)的心肌細胞肥大反應(yīng)使AngⅡ所增大的心肌細胞直徑分別縮短20.5％、40.3％和47.5％，并使AngⅡ增強的ANFmRNA表達呈明顯的濃度依賴性下降(P＜0.001)。與此同時，上述三種濃度的Rb1還使AngⅡ所升高的心肌細胞[Ca2+]i分別抑制30.8％、38.6％和42.5

5、％，使伴隨AngⅡ誘導(dǎo)心肌細胞肥大而出現(xiàn)的CaNmRNA表達上調(diào)呈顯著的濃度依賴性降低。L-arg10-3mol-L-1與Rb1200μg·ml-1的作用相似。NO合酶(NOS)抑制劑L-NAME10-3mol·L-1對Rb1200μg·ml-1在細胞直徑、蛋白含量、ANFmRNA表達、[Ca2+]i、CaNmRNA表達上的抑制作用無明顯影響(P＞0.05)。 結(jié)論：1.人參皂苷Rb1對AngⅡ誘導(dǎo)的體外培養(yǎng)心肌細胞肥大有抑制作