基于脂肪細(xì)胞FFA外溢評(píng)介人參皂苷Rb1抗糖尿病作用.pdf

1、“脂肪細(xì)胞游離脂肪酸外溢學(xué)說(shuō)”是2型糖尿病的重要發(fā)病機(jī)制之一,是開(kāi)發(fā)糖尿病治療藥物的重要理論依據(jù)。本課題在前期的研究基礎(chǔ)上,借助體外脂肪細(xì)胞培養(yǎng)和體內(nèi)肥胖模型小鼠實(shí)驗(yàn),以游離脂肪酸(freefattyacid,FFA)外溢為切入點(diǎn),研究抗糖尿病藥物人參的有效成分人參皂苷Rb1的作用機(jī)制。本課題研究?jī)?nèi)容包括人參皂苷Rb1對(duì)脂肪細(xì)胞基礎(chǔ)狀態(tài)以及胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下FFA外溢水平的影響,觀察人參皂苷Rb1對(duì)脂肪分解的影響以及機(jī)制,闡明人參治療糖尿

2、病的作用機(jī)制。有助于加深對(duì)人參抗糖尿病作用機(jī)制的系統(tǒng)認(rèn)識(shí)和理解,為進(jìn)一步研究抗糖尿病中藥提供新的研究方向。
　　 目的:觀察人參皂苷Rb1對(duì)體外培養(yǎng)的3T3-L1脂肪細(xì)胞和高脂喂養(yǎng)肥胖小鼠的影響,探明人參Rb1對(duì)脂肪細(xì)胞游離脂肪酸溢出的影響,探明其作用機(jī)制。
　　 方法:(1)觀察人參皂苷Rb1對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)及胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下3T3-L1脂肪細(xì)胞脂肪分解的影響;(2)用免疫印跡法觀察人參皂苷Rbl對(duì)胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)下3T3-L

3、1脂肪細(xì)胞中Perilipin表達(dá)影響;(3)激光共聚焦顯微鏡下觀察人參皂苷Rbl對(duì)基礎(chǔ)狀態(tài)下3T3-L1脂肪細(xì)胞中Perilipin蛋白轉(zhuǎn)位的影響;(4)觀察人參皂苷Rb1對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的C57BL/6肥胖小鼠體重、附睪脂肪、肝臟重量及血清NEFA,TC,TG,HDL-C,LDL-C,TNF-α,IL-6水平的影響;人參皂苷Rb1對(duì)肥胖小鼠胰島素敏感性的影響;人參皂苷Rb1對(duì)肥胖小鼠肝臟的病理形態(tài)學(xué)影響;人參皂苷Rb1對(duì)肥胖小鼠附睪脂

4、肪中HSL的表達(dá)及HSL(Ser563)磷酸化表達(dá)水平的影響。
　　 結(jié)果:(1)人參皂苷Rb1沒(méi)有顯著地抑制基礎(chǔ)狀態(tài)下3T3-L1脂肪細(xì)胞脂解,亦沒(méi)有明顯對(duì)抗TNF-α誘導(dǎo)3T3-L1脂肪細(xì)胞脂解的增加;(2)TNF-α誘導(dǎo)分化成熟的3T3-L1脂肪細(xì)胞24小時(shí)引起Perilipin表達(dá)顯著下降,同時(shí)用人參皂苷Rb1干預(yù)24小時(shí)后對(duì)于Perilipin的表達(dá)無(wú)顯著影響,但是對(duì)于TNF-α所導(dǎo)致Perilipin表達(dá)下調(diào)有一定對(duì)

5、抗作用;(3)人參皂苷Rb1促進(jìn)基礎(chǔ)狀態(tài)下3T3-L1脂肪細(xì)胞內(nèi)Perilipin由胞漿向脂滴表面的轉(zhuǎn)位;(4)人參皂苷Rb1顯著降低肥胖小鼠的附睪脂肪含量與體重比值;人參皂苷Rb1沒(méi)有顯著降低血清NEFA,對(duì)TC,TG,HDL-C,LDL-C無(wú)顯著影響;人參皂苷Rb1可以明顯提高改善肥胖小鼠胰島素敏感性,改善胰島素抵抗;模型組小鼠血清TNF-α、IL-6含量高于正常組,人參皂苷Rb1治療后,TNF-α、IL-6水平均明顯下降,與模型組

6、比較有顯著性差異;人參皂苷Rb1可以顯著改善肥胖小鼠肝臟脂肪變性,減少肝細(xì)胞內(nèi)脂肪的異位沉積;人參皂苷Rb1抑制肥胖小鼠附睪脂肪中HSL(Ser563)磷酸化表達(dá),對(duì)HSL表達(dá)無(wú)明顯影響。
　　 結(jié)論:(1)人參皂苷Rb1可能在一定水平上抑制3T3-L1脂肪細(xì)胞基礎(chǔ)水平的脂肪分解;(2)人參皂苷Rb1可能能夠?qū)筎NF-α所導(dǎo)致3T3-L1脂肪細(xì)胞的脂解增加;(3)人參皂苷Rb1可能通過(guò)促進(jìn)脂肪細(xì)胞內(nèi)Perilipin由胞漿向脂