趨化因子受體CXCR4及其配體SDF-1在成釉細胞瘤組織中的表達與意義.pdf

1、目的：
　　成釉細胞瘤(Ameloblastomas，ABs)是發(fā)生于頜骨內的牙源性上皮來源的腫瘤，在國內其發(fā)生率約占牙源性腫瘤的60％。腫瘤內主要含有成釉器樣結構，但是無釉質或其他牙體硬組織形成。大多數(shù)腫瘤發(fā)生于頜骨內，常導致頜骨的膨大和面部的變形。雖屬于良性腫瘤，但其具有局部侵襲和易復發(fā)的生物學行為，少數(shù)病例發(fā)生惡變后可以導致區(qū)域性淋巴結、肺等遠處臟器轉移，甚至有發(fā)生骨轉移的零星報道。WHO2005年新分類將ABs分為4種臨床

2、病理行為不同的變異型，包括:實性/多囊型、骨外/外周型、促結締組織增生型和單囊型。這些亞型在患者年齡、部位、影像學表現(xiàn)以及臨床預后等方面均存在差異，以往對于其治療多采用刮除術，由于其復發(fā)機率較大，所以目前多以擴大切除術為主，但仍有小部分患者有復發(fā)傾向。成釉細胞瘤大多數(shù)來源于牙齒正常發(fā)育完成后殘余的牙源性上皮剩余，少部分來自口腔黏膜上皮基底細胞、含牙囊腫、始基囊腫和角化囊腫襯里上皮的演變。鑒于本病至今沒有有效的治療方法，因此研究其發(fā)病機制

3、，尋找抑制腫瘤新的靶點，對預防和治療本病有著較重要的意義。趨化因子基質細胞衍生因子-1(SDF-1)是CXC趨化因子家族的重要成員，其與特異性受體CXCR4結合后參與機體造血、干細胞生成、白細胞浸潤、神經(jīng)和心血管形成和HIV感染[1]等一系列生理病理過程。目前的許多文獻報道證實了趨化因子受體CXCR4及其配體SDF-1在癌癥中的進展或啟動中都發(fā)揮著重要的作用。因此推測SDF-1/CXCR4可能與成釉細胞瘤的發(fā)生有一定的相關性。所以探討趨

4、化因子受體CXCR4及其配體SDF-1在成釉細胞瘤中蛋白和mRNA水平上的變化與成釉細胞瘤上述生物學行為到底存在著怎樣的關聯(lián)性是本實驗的研究目的。
　　材料與方法：
　　80例成釉細胞瘤存檔蠟塊均來自2007年至2012年中國醫(yī)科大學附屬口腔醫(yī)院病理科，新鮮手術標本-86℃凍存。診斷標準依據(jù)WHO2005年最新分類，以口腔鱗狀細胞癌(OSCC)，正?？谇火つ?NOM)做對照，用免疫組織化學染色SP法觀察SDF-1和CXCR4

5、蛋白在ABs中的表達與分布情況。30例成釉細胞瘤新鮮手術標本均取自于中國醫(yī)科大學附屬口腔醫(yī)院外科手術，用Western-blot法和逆轉錄Real-Time PCR法分別檢測ABs中SDF-1和CXCR4蛋白的表達。
　　結果：
　　一、ABs中SDF-1免疫組化結果
　　SDF-1在ABs中大部分表達于胞質，偶見細胞核表達，以中度陽性強陽性為主，細胞質陽性為85％(68/80)，正常黏膜上皮細胞無表達，在口腔鱗狀細胞

6、癌(OSCC)呈陽性表達。
　　二、ABs中SDF-1蛋白表達結果
　　用Western-blot方法，以GAPDH做內參，檢測了30例ABs中SDF-1表達情況。結果顯示，SDF-1在ABs(0.72±0.14)中的表達明顯高于正常黏膜(0.48±0.04)中的表達，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，但在ABs和口腔鱗狀細胞癌(OSCC)(0.83±0.09)組織中的表達無明顯差別(P＞0.05)。
　　三、ABs中S

7、DF-1基因Real-Time PCR表達結果
　　用RT-PCR方法，以GAPDH作內參，檢測了30例ABs中SDF-1的mRNA表達情況。結果顯示30例ABs中有20例SDF-1在ABs中的表達相對于正常黏膜組織高4.06倍，但相對于口腔鱗癌組織要低2.25倍。
　　四、ABs中CXCR4免疫組化結果
　　CXCR4在ABs中有胞質的表達，并可見少量的細胞核表達，以中度陽性強陽性為主，胞質陽性為87.5％(70/8

8、0)，正?？谇火つど掀ぜ毎麩o表達，在口腔黏膜鱗狀細胞癌(OSCC)呈陽性表達。
　　五、ABs中CXCR4蛋白表達結果
　　用Western-blot方法，以GAPDH做內參，檢測了30例ABs中SDF-1表達情況。結果顯示，CXCR4在ABs(0.72±0.12)中的表達明顯高于正常黏膜(0.43±0.06)中的表達，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，但在ABs和口腔黏膜鱗狀細胞癌(OSCC)(0.78±0.09)組織中的表

9、達無明顯差別（P＞0.05）。
　　六、ABs中CXCR4基因Real-Time PCR表達結果
　　用RT-PCR方法，以GAPDH做內參，檢測了30例ABs中CXCR4的mRNA表達情況。結果顯示30例ABs中有21例SDF-1在ABs中的表達相對于正常黏膜組織高3.82倍，但相對于口腔鱗癌組織要低1.03倍。
　　結論：
　　ABs中SDF-1和CXCR4在mRNA水平和蛋白質水平上表達都上調，并且SDF-