矮牽?；ㄏ阆嚓P的ERF篩選及其調節(jié)機理初探.pdf

1、矮牽牛是一種模式植物，能被用來研究乙烯信號轉導和花香合成途徑。乙烯響應因子ERF在乙烯信號轉導途徑的最下游，含有AP2/ERF結構域，在果實成熟、花衰老、植物生長發(fā)育、逆境響應和激素調節(jié)等方面有重要的作用。前人的研究發(fā)現(xiàn)矮牽牛授粉后香氣會急劇減少，而此時乙烯卻急劇增加，表明矮牽?；ㄏ闶芤蚁┱{節(jié)。ERF作為乙烯信號轉導途徑的組分，為了解矮牽牛ERF在調節(jié)花香合成中的作用機理，本研究在獲得第Ⅷ族的ERF轉錄因子的基礎上，分析了ERF轉錄因子

2、對花香基因的調控關系，PhERF6的表達特性，VIGS沉默PhERF6和PhERF30后，花香轉錄因子和花香合成酶基因的表達，以及PhERF30的亞細胞定位情況，以期了解PhERF與花香合成的關系。研究結果如下：
　　1.利用雙熒光素酶檢測體系，分析了PhERF6、PhERF25和PhERF30轉錄因子對花香基因ODO1、EOBI、EOBII、PAAE、BPBT、PAL表達的影響。結果顯示：PhERF6的超表達顯著降低ODO1、B

3、PBT和PAL的表達。另外，沉默PhERF30后，ODO1、EOBII和EOB1的表達顯著上升，同樣，沉默PhERF25后，EOBI的表達也顯著上升。表明PhERF6、PhERF25和PhERF30都能抑制花香基因的表達來影響花香的生物合成。
　　2.利用酵母雜交系統(tǒng)研究蛋白之間的相互作用，篩選并獲得了與矮牽牛 PhERF6轉錄因子互作的蛋白。PhERF6全長能與ODO1和EOBI的全長互作，EOBI互作的核心域位于N端，說明Ph

4、ERF6可能通過與花香轉錄因子的互作來調控花香的合成。
　　3.實時熒光定量分析表明，PhERF6的表達呈現(xiàn)出晝夜節(jié)律性的表現(xiàn)，和矮牽?；ㄏ汜尫诺囊?guī)律是協(xié)調的，表明PhERF6在矮牽?；ㄏ汜尫诺倪^程中呈現(xiàn)不同的表達特征，參與矮牽?；ㄏ愕纳锖铣?。利用 VIGS沉默體系，減少花瓣中 PhERF6和PhERF30的表達量，花香轉錄因子以及花香合成酶基因的表達量均上升,說明了PhERF6和PhERF30對花香轉錄因子和花香合成酶基因的表