TGF-β1對(duì)慢性骨髓增殖性疾病病人骨髓成纖維細(xì)胞增殖及Smad2、Smad7 mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的:通過(guò)比較不同濃度的TGF-β1對(duì)骨髓成纖維細(xì)胞增殖和對(duì)其Smad2、Smad7 mRNA表達(dá)水平的影響,以及這些影響在正常者和慢性骨髓增殖性疾病病人骨髓成纖維細(xì)胞之間的差異,以了解骨髓纖維化的原理. 方法:分離2例缺鐵性貧血(作為正常對(duì)照)、一例原發(fā)性血小板增多癥和一例慢性粒細(xì)胞白血病病人骨髓液中的成纖維細(xì)胞,用含10﹪FCS的DMEM低糖培養(yǎng)液,在37℃,5﹪CO<,2>培養(yǎng)箱中培養(yǎng),0.25﹪胰蛋白酶+0.02﹪EDT

2、A消化傳代;MTT法測(cè)定0.01、0.1、1、2、5ng/m1的TGF-β1對(duì)正常者和慢性骨髓增殖性疾病病人的骨髓成纖維細(xì)胞增殖作用的影響;RT-PCR測(cè)定0.01、0.1、1、5ng/ml的TGF-β1對(duì)正常者和慢性骨髓增殖性疾病病人的骨髓成纖維細(xì)胞Smad2、Smad7 mRNA表達(dá)的影響. 結(jié)果:MTT法顯示2ng/ml及5ng/mlTGF-β1對(duì)骨髓成纖維細(xì)胞有促增殖作用(與對(duì)照組相比P值小于0.05),同一濃度的TGF

3、-β1對(duì)正常者和骨髓增殖性疾病病人骨髓成纖維細(xì)胞促增值作用沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上的差異;RT-PCR顯示Smad2和Smad7mRNA的表達(dá)在TGF-β1濃度為0-lng/ml之間時(shí)隨著其濃度的增加而增加,而在TGF-β1濃度為5ng/ml時(shí),Smad2 mRNA表達(dá)量有所下降.相同濃度TGF-β1刺激下,正常者和骨髓增殖性疾病病人骨髓成纖維細(xì)胞Smad2和Smad7 mRNA的表達(dá)沒(méi)有顯著差異. 討論:一定濃度的TGF-β1可促使骨