突變型Presenilin-1基因對全反式維甲酸誘導PC12細胞功能的影響.pdf

1、該課題利用全反式維甲酸(RA)作為誘導劑,體外誘導PC12細胞,運用MTT法、免疫細胞化學、免疫熒光染色、流式細胞儀、放射酶學和TUNEL法等方法,通過觀察形態(tài)學、細胞生長曲線和生長周期、膽堿乙?；D移酶(ChAT)和乙酰膽堿酯酶(AchE)活性變化及細胞凋亡的情況,研究不同濃度RA誘導PC12細胞呈現(xiàn)擬膽堿能神經(jīng)元表型的情況,探討RA誘導PC12細胞呈現(xiàn)擬膽堿能神經(jīng)元表型的最佳條件,為體外研究AD的發(fā)病提供細胞模型;同時,利用基因工程

2、技術,將野生型(WT)和突變型PS-1基因L286V轉染誘導的擬膽堿能神經(jīng)元,觀察突變型PS-1基因L286V對擬膽堿能神經(jīng)元形態(tài)、細胞生長曲線、生長周期、ChAT和AchE活性的變化,以及細胞凋亡的影響,探討PS-1基因突變引起細胞形態(tài)和功能改變的可能機制.該研究結果表明RA具有誘導PC12細胞呈現(xiàn)擬膽堿能神經(jīng)元表型的作用,利用適當濃度的RA誘導產(chǎn)生的擬膽堿能神經(jīng)元可以作為膽堿能神經(jīng)元的替代細胞用于某些AD的實驗研究.10μmol/L