基于多指標(biāo)聯(lián)合和UPLC-MS檢測(cè)對(duì)結(jié)核性胸膜炎的診斷評(píng)估.pdf

1、第一部分、胸水ADA、TB-DNA和IFN-γ的聯(lián)合檢測(cè)對(duì)結(jié)核性胸膜炎的診斷價(jià)值評(píng)估
　　 目的:
　　 本研究通過TB-DNA、腺苷脫氨酶(ADA)和IFN-γ檢測(cè)結(jié)核性胸腔積液，探討三者單獨(dú)或聯(lián)合檢測(cè)對(duì)結(jié)核性胸腔積液的診斷價(jià)值及臨床可行性，為臨床上尋求一種實(shí)用、可靠、簡(jiǎn)便的診斷方法提供依據(jù)。
　　 方法:
　　 收取2012年11月-2013年4月在天津市海河醫(yī)院住院患者的胸水標(biāo)本。最終研究對(duì)象為結(jié)核

2、性胸腔積液的患者共43例，男23例，女20例，平均年齡(41.01±12.35)歲。當(dāng)日測(cè)定胸水ADA、IFN-γ和TB-DNA。3種檢測(cè)方法進(jìn)行靈敏度(Se）、特異度(Sp)、陽性預(yù)告值(PPV)、陰性預(yù)告值(NPV)、準(zhǔn)確度(CA)、Youden指數(shù)的評(píng)估，并進(jìn)行并聯(lián)、串聯(lián)聯(lián)合檢測(cè)的診斷效能評(píng)價(jià)。
　　 結(jié)果:
　　 在并聯(lián)試驗(yàn)中，ADA or IFN-γ組合的敏感度最高，與TB-DNA or IFN-γ組合比較差異

3、無顯著性(P＞0.05)，與ADA or TB-DNA有顯著性差異。TB-DNAor IFN-γ組合的特異度最高(94.27％）與其他兩個(gè)組合有顯著性差異P＜0.05)。在串聯(lián)試驗(yàn)中，2種方法聯(lián)合檢測(cè)特異度無顯著性差異(P＞0.05)，ADA and IFN-γ組合的敏感度最高，與其他兩種方法差異有顯著性。3種方法串聯(lián)較2種方法聯(lián)合檢測(cè)的特異性最高(99.98％)。
　　 結(jié)論:
　　 胸水ADA、TB-DNA和IFN-

4、γ檢測(cè)不能單獨(dú)作為診斷結(jié)核性胸膜炎的最有效的方法，僅僅是診斷的輔助方法。任意2種聯(lián)合檢測(cè)其陽性檢出率顯著高于單一方法檢測(cè)的結(jié)果，且敏感性和特異性均有大幅度提高。3種方法聯(lián)合檢測(cè)的敏感性和特異性高于2種方法聯(lián)合檢測(cè);可以認(rèn)為聯(lián)合檢測(cè)解決了傳統(tǒng)方法陽性率偏低，培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，以及操作技術(shù)復(fù)雜等相關(guān)問題，大幅度提高了結(jié)核性胸膜炎的診斷敏感性，具有較高的臨床應(yīng)用價(jià)值，是診斷結(jié)核性胸腔積液的一種快速、準(zhǔn)確、有效的實(shí)驗(yàn)方法。
　　 第二部分、基

5、于UPLC-MS的結(jié)核性胸膜炎胸水的代謝組學(xué)輪廓分析
　　 目的:
　　 利用超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)(UPLC-MS)分析結(jié)核性胸膜炎患者胸水，尋找潛在代謝標(biāo)志物組，輔助結(jié)核性胸膜炎的早期診斷。
　　 方法:
　　 收取2012年11月-2013年4月在天津市海河醫(yī)院住院患者的胸水標(biāo)本。最終研究對(duì)象共有62例，其中男33例，女29例;將其分成結(jié)核組即診斷為結(jié)核性胸腔積液的患者共43例，男23例，女2

6、0例，平均年齡(41.01±12.35)歲。對(duì)照組共19例，其中男10例，女9例，平均年齡(45.56±19.43)歲，其中肺癌引起的胸腔積液10例，組成癌癥組(C);心力衰竭引起的心包漏出液9例，組成漏出液組(S)。診斷標(biāo)準(zhǔn)經(jīng)組織病理學(xué)或組織細(xì)胞學(xué)證實(shí)。兩組年齡無偏倚。利用UPLC-MS對(duì)樣本進(jìn)行檢測(cè)。利用MZmine2.0軟件對(duì)得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行前處理，再將處理所得數(shù)據(jù)導(dǎo)入到SIMCA-P+12.0.1.0（瑞典Umetrics公司）進(jìn)

7、行分析。通過SIMCA-P+12.0.1.0的模式識(shí)別方法構(gòu)建正交偏最小二乘判別分析(OPLS-DA)模型，根據(jù)VIP值及VIP置信區(qū)間進(jìn)行代謝標(biāo)志物的初步篩選，然后利用SPSS15.0(SPSS，USA)對(duì)篩選出的代謝標(biāo)志物進(jìn)行獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn)排除P值大于0.05的變量進(jìn)而篩選出潛在代謝標(biāo)志物。
　　 結(jié)果:
　　 1.基于胸水代謝物數(shù)據(jù)建立的OPLS-DA模型，驗(yàn)證結(jié)果模型的預(yù)測(cè)準(zhǔn)確度達(dá)到100％，該模型能夠很好地

8、區(qū)分結(jié)核性胸膜炎組、肺癌組和漏出液組。
　　 2.尋找到46個(gè)特征離子，鑒定出了其中的6個(gè)，6個(gè)代謝標(biāo)志物在結(jié)核性胸膜炎組4個(gè)呈上調(diào)趨勢(shì)，2個(gè)呈下調(diào)趨勢(shì)。
　　 3.羥基膽甾醇、L-苯丙氨酸、生育三烯酚、溶血磷脂這4種代謝物有望成為結(jié)核性胸膜炎的診斷和鑒別診斷更為有效的手段。
　　 結(jié)論:
　　 代謝組學(xué)的核心概念認(rèn)為個(gè)體的代謝狀態(tài)能夠非常緊密地反映其健康狀態(tài)，這種代謝狀態(tài)是基因組編碼和環(huán)境修飾雙重作用的

9、結(jié)果。本研究采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析技術(shù)(UPLC-MS)對(duì)結(jié)核性胸膜炎組、肺癌組和漏出液組進(jìn)行代謝組學(xué)研究，共篩選并初步鑒定出46個(gè)代謝標(biāo)志物，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)有6種物質(zhì)在結(jié)核性胸膜炎的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)生特異性變化，有望成為結(jié)核性胸膜炎代謝標(biāo)志物。本實(shí)驗(yàn)表明由代謝輪廓構(gòu)建的OPLS-DA模型可以很好的區(qū)分結(jié)核性胸膜炎與肺癌組和漏出液組;研究結(jié)果能為尋找結(jié)核性胸膜炎的特征標(biāo)志物及早期診斷提供了新的思路與方法。