轉(zhuǎn)錄因子EGR-3在肝癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、【研究背景】
　　肝細(xì)胞癌（HCC，以下簡(jiǎn)稱肝癌）是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，在我國(guó)位居第二的癌癥“殺手”。我國(guó)每年約有11萬(wàn)人死于肝癌，其中男性8萬(wàn)，女性3萬(wàn)，占全世界肝癌死亡人數(shù)的45％。我國(guó)肝癌的主要病因?yàn)槁砸倚透窝撞《荆℉BV）感染和肝硬化，但其發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制尚未完全闡明。
　　在分子生物學(xué)中，轉(zhuǎn)錄因子（transcription factor）是指能夠結(jié)合在某基因上游特異核苷酸序列上的蛋白質(zhì)，這些蛋白質(zhì)能調(diào)控其基

2、因的轉(zhuǎn)錄。目前研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)錄因子諸如(NF-Кb,AP-1,HIF,SNAIL,TWIST等)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展，侵襲和轉(zhuǎn)移有著密切關(guān)系。早期生長(zhǎng)反應(yīng)基因（EGR）是一類(lèi)能被多種刺激比如缺氧、感染等快速誘導(dǎo)而產(chǎn)生的轉(zhuǎn)錄因子。它包括EGR-1,-2,-3,-4四個(gè)家庭成員，其共同特點(diǎn)是都含有一個(gè)可以和DNA結(jié)合的鋅指結(jié)構(gòu)(Cys2His2 zinc finger domain),與其他基因啟動(dòng)子區(qū)GCGG/TGGGCG序列結(jié)合，從而發(fā)揮轉(zhuǎn)錄調(diào)

3、控作用。該家族成員鋅指結(jié)構(gòu)以外的側(cè)翼序列并不相同，其發(fā)揮著不同的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)作用，研究表明該家族其主要參與調(diào)節(jié)細(xì)胞發(fā)育及周期。其中關(guān)于EGR-1研究最為充分，它與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和侵襲有著密切的關(guān)系。但目前尚未見(jiàn)EGR-3與消化系統(tǒng)腫瘤的報(bào)道。
　　【目的】
　　研究EGR-3在肝癌臨床標(biāo)本及肝癌細(xì)胞系中的表達(dá)情況，為進(jìn)一步研究其功能，探討其在肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用及意義，闡明肝癌的發(fā)生機(jī)制提供線索。
　　【方法】
　

4、　1.通過(guò)免疫組化的方法檢測(cè)EGR-3在125例肝癌病人病理切片及5例正常肝臟組織中的表達(dá)，并分析其與患者臨床病理參數(shù)的關(guān)系。
　　2.收集15對(duì)肝癌及其癌旁新鮮組織標(biāo)本，提取蛋白，通過(guò)western blot檢測(cè)該基因在肝癌及癌旁組織中的差異表達(dá)。
　　3.通過(guò)western blot方法研究EGR-3在肝癌細(xì)胞系HepG2,SMMC7721,FHCC98,HepG2.2.15中的表達(dá)。
　　【結(jié)果】
　　EG

5、R-3免疫組化結(jié)果示：其在125例肝癌組織中表達(dá)陽(yáng)性率（30/125,24％）明顯低于其在癌旁組織中的陽(yáng)性表達(dá)（100/125,80％)(P<0.05)。EGR-3在癌旁組織細(xì)胞的胞漿和胞核多呈顆粒狀強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。肝癌組織胞漿漿中多呈弱陽(yáng)性表達(dá)或者不表達(dá)，且細(xì)胞核幾乎不表達(dá)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，其染色強(qiáng)度與肝癌患者的年齡、性別、腫瘤大小及分化程度未見(jiàn)明顯相關(guān)性(P>0.05)。肝癌組織蛋白westernblot的結(jié)果也與此相一致，15對(duì)肝癌組織