降膽固醇乳酸菌體外篩選條件優(yōu)化的研究.pdf

1、乳酸菌對人體的益生效果已經(jīng)得到人們的普遍認可，隨著社會發(fā)展和科研的進步，針對現(xiàn)在社會的高血脂人群的不斷增加，乳酸菌的降膽固醇特性成為乳酸菌界研究的熱點，并取得了很大的進展。由于乳酸菌降膽固醇的機理及其復雜，因此乳酸菌降膽固醇體外篩選方法一直是評價乳酸菌降膽固醇效果的有效篩選方法。
　　 本實驗以10株乳酸菌為研究對象，從三方面對降膽固醇乳酸菌體外篩選中存在的問題進行了研究探討，(1)降膽固醇乳酸菌體外篩選培養(yǎng)基對篩選結(jié)果的影響:

2、對三種現(xiàn)在研究中用到的高膽固醇培養(yǎng)基蛋黃-MRS、膽固醇膠束溶液-MRS和乙醇膽固醇溶液-MRS培養(yǎng)基的體外篩選效果進行了比較，并對篩選效果較好的培養(yǎng)基的配制方法進行了探討;(2)乳酸菌培養(yǎng)時間對其降膽固醇能力的影響:主要探討了乳酸菌的降膽固醇特性與發(fā)酵時間的關系，重點比較了處于穩(wěn)定期和對數(shù)生長期的乳酸菌體外降膽固醇效果的不同;(3)體外篩選培養(yǎng)基中膽固醇快速測定方法探討研究:參考血液中膽固醇的測定方法，探討了磷鐵硫法、鄰苯二甲醛直接顯

3、色法和硫酸鐵銨顯色法測定培養(yǎng)基中膽固醇含量的效果，并與常用到的皂化提取鄰苯二甲醛顯色法進行了比較。主要研究結(jié)果如下:
　　 (1)10株乳酸菌在蛋黃-MRS、膽固醇膠束溶液-MRS和乙醇膽固醇溶液-MRS培養(yǎng)基中均表現(xiàn)出降膽固醇特性，但是在三種培養(yǎng)基中的降膽固醇能力高低順序不完全相同，有的株菌差異顯著;相比較而言膽固醇膠束溶液-MRS培養(yǎng)基有較好的篩選效果;膽固醇膠束配制最佳方法為:0.1g膽固醇，0.2g膽鹽，0.1g蔗糖酯充

4、分混勻，加入1mL吐溫80充分混勻，再加入3mL冰乙酸，混勻后水浴70℃加熱至充分溶解，然后超聲乳化15min，即得到均勻的膽固醇膠束溶液。
　　 (2)乳酸菌的降膽固醇能力并不都是隨著發(fā)酵時間的延長呈現(xiàn)規(guī)律性增加趨勢的;乳酸菌在高膽固醇培養(yǎng)基中生長10h就能表現(xiàn)出明顯的降膽固醇特性;對數(shù)生長期的乳酸菌比穩(wěn)定期的乳酸菌降膽固醇能力稍高;用乳酸菌的膽固醇去除效力評價乳酸菌的降膽固醇能力比用膽固醇去除率更具有參考價值。