內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激介導(dǎo)高脂及棕櫚酸致骨骼肌胰島素抵抗及非諾貝特的干預(yù)機(jī)制初探.pdf

1、目的：
　　觀(guān)察高脂飲食（high-fat diet，HFD）對(duì)雌性SD大鼠骨骼肌的影響，探討非諾貝特（fenofibrate，F(xiàn)F）對(duì)高脂及棕櫚酸導(dǎo)致的骨骼肌胰島素抵抗的保護(hù)作用是否與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress，ERS）有關(guān)。
　　方法：
　　雌性SD大鼠隨機(jī)分為三組：標(biāo)準(zhǔn)飲食組（standard control diet,SCD）、高脂飲食組（HFD）及治療組（HFD+FF

2、）。高脂組和治療組大鼠先予以高脂飲食20wk后，高脂組大鼠繼續(xù)予以高脂飲食8wk，治療組大鼠予以非諾貝特（30mg·kg-1·d-1）灌胃治療8wk。每周監(jiān)測(cè)大鼠體重，第28周檢測(cè)血清生化指標(biāo)TC、TG、LDL-C、HDL-C，葡萄糖耐量試驗(yàn)（GTT）和胰島素耐量試驗(yàn)（ITT）測(cè)定胰島素抵抗(IR)，Real-time RT-PCR測(cè)定骨骼肌組織葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78（GRP78）、轉(zhuǎn)錄因子GADD153（CHOP）、肌醇酶1α（IRE1α

3、）、真核起始因2的α亞基（eIF2α）和過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α（PPARα）基因表達(dá)，Western-blot法檢測(cè)骨骼肌組織GRP78蛋白的表達(dá)水平。將骨骼肌細(xì)胞C2C12分組：正常對(duì)照組（normal control group,NC）、模型組（棕櫚酸組，palmitic acid,PA）、陽(yáng)性對(duì)照藥組（衣霉素組，tunicamycin,TM）、治療組（棕櫚酸+非諾貝特酸，PA+FA），RT-PCR測(cè)定GRP78、CHOP、I

4、RE1α和eIF2αmRNA的表達(dá)水平，Western-blot檢測(cè)GRP78、Akt和p-Akt蛋白表達(dá)水平，免疫熒光檢測(cè)CHOP蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　?。?）GTT實(shí)驗(yàn)提示HFD組大鼠給予葡萄糖30 min后血糖值達(dá)高峰，且較SCD組、HFD+FF組血糖峰值升高，此后緩慢下降；與HFD組大鼠相比，HFD+FF組大鼠空腹血糖降低，給予葡萄糖后30 min時(shí)峰值降低，血糖波動(dòng)較小。ITT實(shí)驗(yàn)顯示大鼠注射胰島素后，SC

5、D組血糖迅速下降，30 min時(shí)達(dá)最低值后血糖緩慢上升；HFD組血糖緩慢下降，且始終維持在較高水平，90 min時(shí)達(dá)最低值后血糖緩慢上升；HFD+FF組大鼠各點(diǎn)血糖值介于HCD和SCD組之間，注射胰島素后血糖下降至60 min時(shí)達(dá)最低值，隨后緩慢上升。
　?。?）與SCD組大鼠相比，HFD組大鼠體重顯著增加（P<0.05），血清TG、TC水平明顯升高，HDL-C水平顯著下降（P<0.05）；與HFD組大鼠相比，非諾貝特干預(yù)后能夠顯

6、著減少大鼠體重、改善肥胖，降低血清TC、TG水平，增加血清HDL-C水平（P<0.05）。
　?。?）與SCD組大鼠相比，HFD組大鼠GRP78、CHOP、IRE1α和eIF2α基因表達(dá)水平均明顯上調(diào)，與HFD組大鼠相比，非諾貝特治療后PPARα表達(dá)水平明顯增加，GRP78、CHOP、IRE1α和eIF2α基因表達(dá)水平下調(diào)；
　?。?）與NC組相比，PA組骨骼肌細(xì)胞GRP78、CHOP、IRE1α和eIF2α基因表達(dá)水平顯著