血管緊張素Ⅱ及其受體對白血病細胞增殖的影響及機制研究.pdf

1、第一部分血管緊張素Ⅱ對白血病細胞增殖的作用及其受體的分布 目的：研究血管緊張素Ⅱ對白血病細胞增殖的影響和血管緊張素Ⅱ受體在白血病患者骨髓單個核細胞上的表達，探討其與白血病發(fā)生發(fā)展的可能關系。為研究白血病發(fā)病機制提供新思路。 方法：1.收集初治急性白血病患者的骨髓單個核細胞，以血小板減少性紫癜患者作為對照組。運用免疫組化方法檢測細胞血管緊張素Ⅱ受體蛋白表達。2.以人白血病細胞系K562為研究對象，采用RPMI-1640培養(yǎng)

2、基進行體外培養(yǎng)，以終濃度為0、10-9、10-8、10-7、10-6mol/L的AngⅡ，分別在6h，12h，24h，48h作用于K562細胞，MTT法檢測K562細胞增殖率。 結果：免疫組化結果顯示AT1R與AT2R在對照組及白血病患者單個核細胞的胞膜和胞漿中均有表達。白血病患者AT1R蛋白的表達顯著高于AT2R蛋白的表達(P＜0.05)，正常對照組AT1R蛋白較AT2R蛋白表達水平低，但差異無顯著性。K562細胞的增殖在一定

3、范圍內與AngⅡ濃度及作用時間呈正相關，在10-7mol/L作用6、12小時的增殖效率最顯著。 結論：白血病患者的骨髓單個核細胞胞膜和胞漿中部存在AngⅡ受體的表達，AT1R在白血病細胞上的優(yōu)勢表達可能是促進白血病發(fā)生發(fā)展的重要因素。AngⅡ能以時間和劑量依賴的方式促進白血病細胞的增殖。 第二部分血管緊張素Ⅱ促進白血病細胞增殖機制的初步研究 目的：研究受體拮抗劑對血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)促進K562細胞增殖的影響

4、，及AngⅡ對K562細胞分泌血管內皮細胞生長因子(VEGF)的作用，探討AngⅡ促進白血病細胞增殖的作用機理和途徑。 方法：以人白血病K562細胞系為研究對象，采用RPMI-1640培養(yǎng)基進行體外培養(yǎng)，分別以AT1R和AT2R的拮抗劑(Valsartan和PD123319)預處理K562細胞30min，以MTT法觀察它們對血管緊張素Ⅱ促K562細胞增殖的影響。通過ELISA方法分析AngⅡ對K562細胞分泌VEGF的調節(jié)。

5、 結果：AngⅡ(10-7mol/L)引起K562細胞明顯增殖，AT1R拮抗劑Valsartan(10-6mol/L)能完全抑制AngⅡ的促增殖效應，而AT2R拮抗劑PD123319對AngⅡ的增殖效應無明顯影響。Valsartan單獨作用不引起K562細胞凋亡。AngⅡ使K562細胞分泌的VEGF升高，而AT1R的拮抗劑Valsartan能有效的抑制AngⅡ的效應。 結論：AngⅡ通過激活AT1R促進K562細胞增殖。另外