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文檔簡介
1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文CD44反義寡核苷酸抑制胃癌細胞SGC7901粘附侵襲的實驗研究姓名:崔越宏申請學位級別:碩士專業(yè):腫瘤學指導教師:徐惠綿20020501Biotin標記的CD44反義寡核苷酸(asODN)配合組織細胞化學方法觀察轉染后其在細胞內(nèi)的分布,并用免疫組化的方法檢測是否有蛋白表達的變化,然后用脂質體將CD44asODN轉染SGC7901胃癌細胞系,通過lit—PCR、流式細胞術、MTY法、聚碳酸酯膜侵襲試驗分別測定CD
2、44mRNA和細胞表面CD44蛋白表達及癌細胞粘附力、侵襲力的變化,透射電鏡觀察超微結構,統(tǒng)計分析采用SPSSl00軟件行配對計量資料t檢驗。結果1生物素標記的CD44asODN轉染SGC7901細胞3小時,未見胞漿及胞核內(nèi)出現(xiàn)明顯變化,6小時才見細胞內(nèi)出現(xiàn)淺棕色顆粒;2從免疫組化的結果可以看出轉染36小時后細胞C13嗎4蛋白表達有所下降;3RT—PCR結果顯示asODN組CD44/fl—actinmRNA相對定量比值(0641tO08
3、4)較對照組(08940120)顯著降低(PO05);4流式細胞術檢測asODN組平均熒光指數(shù)為(20870577)較對照組(52831783)明顯下降(P005);5粘附實驗表明asODN組粘附力(01590025)較對照組(o2940058)顯著下降(P001);6asODN組穿透聚碳酸酯膜的細胞數(shù)(751291)較對照組(15751708)亦有顯著降低(P001);7透射電鏡觀察表明經(jīng)asODN作用后,癌細胞表面?zhèn)巫愫颓驙钔黄鹈黠@
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