人卵巢癌細胞裸鼠移植瘤多藥耐藥模型的建立.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:傳統(tǒng)的MDR顯型的內在機制是細胞過度表達MDRl基因編碼的170-kDa的跨膜糖蛋白(P-gp),MDRl基因屬于ABC(ATP-bindingCassette)轉運蛋白家族的一員,其過度表達在體外實驗中顯示對廣譜化療藥物的耐藥。因此急需發(fā)展一種高效低毒的方法來逆轉P-gp介導的多藥耐藥,目前國內研究P-gp介導耐藥的合適體內模型還很少,限制了多藥耐藥的研究。本實驗旨在建立人卵巢癌裸鼠荷瘤多藥耐藥模型,并探討其生物學特性。

2、 方法:將BALB/C/nu/nu裸鼠隨機分為二大組:體外誘導組和體內誘導組。體外誘導組分為耐藥株組(組Ⅰ)和敏感株組(組Ⅱ)。體內誘導組分為:誘導組(組Ⅲ)和對照組(組Ⅳ),每組20只。組Ⅰ:皮下移植人卵巢癌耐藥細胞株OVCAR/AR:組Ⅱ:皮下移植人卵巢癌細胞株OVCAR-3。待腫瘤體積達100mm3時,以上兩組行尾靜脈注射化療藥物,化療21天后處死裸鼠。組Ⅲ、組Ⅳ:皮下移植人卵巢癌敏感細胞株OVCAR-3,待腫瘤體積達100mm3

3、時,組Ⅲ反復瘤周注射小劑量阿霉素(ADM)誘導腫瘤耐藥,組Ⅳ采用同等體積生理鹽水同步注射作為對照,誘導8周后處死裸鼠。觀察各組腫瘤模型的成瘤率和生長率,采用RT-PCR檢測腫瘤內MDRl mRNA的表達水平,免疫組織化學染色檢測腫瘤細胞P-糖蛋白的表達水平。 結果:四組裸鼠成瘤率均為100﹪,病理學檢查提示人卵巢癌細胞裸鼠移植瘤具有人卵巢癌組織學特征?;熎诮MⅠ腫瘤重量和生長率均明顯高于組Ⅱ,差異有顯著性;組Ⅰ MDRl mRN

4、A及P-gp蛋白表達水平均明顯高于組Ⅱ,結果分別為(56.2±5.8)﹪和(2.4±0.2)﹪,(29.1±2.2)﹪和(2.2±0.1) ﹪,差異有顯著性。體內誘導期組Ⅳ腫瘤體積明顯高于組Ⅲ,差異有顯著性;組ⅢMDR1 mRNA及P-gp蛋白表達水平均明顯高于組Ⅳ,結果分別為(42.3±6.4)﹪和(2.5±0.3)﹪,(21.8±2.6)﹪和(2.4±0.3)﹪差異有顯著性。 結論:直接移植人卵巢癌細胞株OVCAR-3的耐藥

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