血漿游離DNA檢測FLT3-ITD突變及ITD特征對急性髓細胞白血病個體化診斷的意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討血漿游離DNA FLT3基因中內部串聯重復序列(internal tandemduplication,ITD)突變及ITD特征,為急性髓細胞白血病(acute myelocytic leukemia,AML)無創(chuàng)性診斷、個體化的分子靶向治療和療效監(jiān)視提供新的策略。
  方法:1.提取88例初診AML患者和40例對照者(20例健康體檢者及20例良性血液病患者)血漿游離DNA及骨髓細胞DNA,以PCR擴增出管家基因globi

2、n作為DNA提取成功的判定標準,核酸濃度測量儀測量88例初診AML患者和40例對照者血漿游離DNA濃度,并進行比較;2.采用PCR方法同步平行檢測88例初診AML患者血漿游離DNA和骨髓細胞DNA中FLT3-ITD基因突變,產物經瓊脂糖凝膠電泳后,在凝膠成像分析儀上觀察結果,并將檢測結果進行比較。3.毛細管電泳法同步平行檢測FLT3-ITD陽性患者血漿游離DNA和骨髓細胞DNA中的ITD數量,并將檢測結果進行比較。
  結果:1.

3、88例初診AML患者血漿游離DNA濃度明顯高于20例健康體檢者及20例良性血液病患者,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);健康體檢者與良性血液病患者間、FAB分型不同的初診AML患者間的血漿游離DNA濃度差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。2.88例初診AML患者中發(fā)生FLT3-ITD突變18例(20.5%,18/88),該結果與骨髓細胞DNA檢測結果完全一致。3.18例FLT3-ITD陽性患者血漿游離DNA的PCR產物經毛細管電泳后結果顯

4、示,13例(72.22%,13/18)患者出現一條ITD條帶峰,其骨髓細胞DNA結果與血漿游離DNA結果一致;5例(27.78%,5/18)患者血漿出現多條ITD條帶峰,而骨髓細胞只有2例結果與其血漿結果一致,另外3例結果不具有一致性。
  結論:1、初診AML患者血漿游離DNA濃度明顯高于健康人及良性血液病患者;2、初診AML患者血漿游離DNA中檢測白血病特異性的FLT3-ITD基因突變與直接檢測骨髓細胞DNA結果一致,提示在未

5、來可以通過檢測白血病患者血漿游離DNA中特異性的基因突變來診斷白血病,對白血病的無創(chuàng)性診斷、個體化治療和監(jiān)測預后有重要意義;3、18例FLT3-ITD陽性的患者毛細管電泳檢測血漿游離DNA中ITD數量,其中15例血漿游離DNA檢測結果與骨髓細胞DNA檢測結果一致,3例血漿游離DNA檢測結果出現多條ITD條帶峰而骨髓細胞DNA檢測結果并未出現,我們可以推測通過檢測FLT3-ITD陽性AML患者來源于白血病細胞的血漿游離DNA中ITD的數量

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