基于抗生素分離-富集和分析的新方法及應用研究.pdf

1、抗生素目前被廣泛用于養(yǎng)殖業(yè)中，濫用情況日益嚴重。由于不能完全被機體吸收，抗生素以原形或其代謝物形式經由畜禽糞尿排入環(huán)境，經不同途徑對土壤和水體造成污染，直接或間接地嚴重威脅人類健康和生態(tài)平衡。食品安全和環(huán)境保護越來越受到人們的高度關注，迫切需要發(fā)展高效率、高選擇性和高靈敏度的抗生素殘留分離/富集和分析方法，提供可靠有效的監(jiān)測數據。
　　 本課題旨在利用雙水相氣浮溶劑浮選、電荷轉移分光光度法和分子印跡等新技術手段分離/富集和檢測食

2、品和環(huán)境中的多種抗生素，為研究抗生素殘留檢測奠定理論和實踐基礎，為這些技術手段拓展新的方向。主要研究內容和結論如下：
　　 1.進行了異丙醇/K2HPO4雙水相氣浮溶劑浮選體系下分離富集環(huán)境水樣中殘留的羅紅霉素的研究，建立了硫酸顯色法測定富集后的羅紅霉素。最佳的浮選條件為：浮選溶劑為異丙醇5 ml，分相鹽K2HPO4的濃度為48％(g/100 ml)，pH值為9.0，浮選池體積為50 ml，氣體流速15 ml/min，浮選時間3

3、0 min。在此條件下的浮選率達到93％，富集倍數9.3。通過對環(huán)境水樣的加標回收實驗，浮選率達到90％以上。并與雙水相萃取進行對照實驗，證明溶劑浮選法更佳。
　　 2.研究了正丙醇/(NH4)2SO4雙水相氣浮溶劑浮選分離/富集環(huán)境水樣中殘留替米考星的方法，建立了替米考星的HPLC測定方法，最佳浮選條件為：浮選溶劑為正丙醇5 ml，分相鹽(NH4)2SO4濃度為36％(g/100 ml)，pH為3，浮選池體積為100 ml，氣

4、體流速為20 ml/min，浮選時間30 min。在最佳條件下浮選率為84％，富集倍數16.8。與雙水相萃取相比，雙水相浮選富集倍數高，處理水樣體積大，正丙醇用量少，無乳化現象。適于環(huán)境殘留抗生素的分析。
　　 3.以紫外分光光度法為手段，研究了電子給體羅紅霉素(roxithromycin)與電子受體碘(I2)之間的電荷轉移反應，確定了反應的最佳條件。實驗結果表明：羅紅霉素與碘在乙醇溶液中室溫下即可生成穩(wěn)定的1:1.5型絡合物，

5、λmax=290，360 nm，羅紅霉素濃度在2～500 mg/L范圍內服從比耳定律，用建立的方法測定膠囊、分散片中的羅紅霉素含量，結果與藥典方法一致，回收率為96.2％～101.94％。
　　 4.建立了亞甲基藍電荷轉移光度法測定紅霉素的新方法。以二次石英蒸餾水為溶劑，紅霉素與亞甲基藍在常溫下進行電荷轉移反應生成1:1穩(wěn)定的絡合物，最大吸收波長為678 nm。此法靈敏度高(e=1.59×104L/(mol·cm))，精密度較好

6、(在25ml溶液中測定5.0×103 mg/ml紅霉素9次，RSD=3.0％)。紅霉素的濃度在0.0008～0.0250 mg/ml范圍內服從Beer定律，方法的檢出限為0.11μg/ml。探討了反應機理，其中紅霉素作為電子給予體、亞甲基藍作為電子接受體發(fā)生了荷移反應。方法可靠，重現性好，可用于紅霉素腸溶片和獸用紅霉素含量測定。
　　 5.采用沉淀聚合法制備了加替沙星分子印跡聚合物。采用掃描電鏡對制備所得的分子印跡聚合物進行了表

7、征。采用紫外分光光度法和紅外光譜法對分子印跡聚合物的吸附性能進行了研究；結果表明，通過沉淀聚合法制備得到分子印跡聚合物微球，粒徑大約在0.4μm左右。制備工藝比較簡單省時，與封管聚合法相比，省卻了研磨，篩分等繁瑣的后處理工序。
　　 6.利用表面分子印跡技術在硅介孔材料SBA-15上制備替米考星分子印跡聚合物。用拉曼光譜和掃描電鏡表征。利用吸附平衡實驗研究了聚合物對替米考星的吸附性能，結果表明制備的印跡聚合物吸附速度快，吸附容量

8、大。在最佳實驗條件下，聚合物對替米考星的吸附平衡和動力學數據分別符合Freundlich等溫線模型和Pseudo-second-order動力學模型。該聚合物可用于環(huán)境殘留替米考星分離和富集。
　　 7.以硅烷化的SBA-15為載體材料，合成替米考星表面分子印跡聚合物，將該印跡聚合物作為固相萃取填料來吸附水樣中的替米考星。對固相萃取過程中的上樣溶劑、洗脫溶劑、洗脫次數等條件進行了優(yōu)化選擇，同時，測定環(huán)境樣品中的替米考星。結果表明