IFN-γ在斷乳期小鼠RSV再次感染后氣道炎癥和氣道高反應性中的作用及其機制研究.pdf

1、第一部分斷乳期小鼠RSV再次感染模型建立及意義
　　目的：研究呼吸道合胞病毒( respiratory syncytial virus，RSV)感染斷乳期小鼠后再感染氣道炎癥類型及免疫應答特點。
　　方法：雌性C57BL/6小鼠隨機分為PBS對照組(3周PBS/8周PBS)、成年期首次感染組(3周PBS/8周RSV)、再感染組(3周RSV/8周RSV)。首次或再次感染后檢測小鼠體重，感染后第3、7天，處死小鼠，行支氣管肺泡灌

2、洗液(BALF)中細胞計數及分類計數；病理切片H&E染色后行肺組織炎癥病理評分；ELISA法檢測BALF中細胞因子（IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-17A）的變化。
　　結果：體重變化：RSV感染后小鼠體重明顯降低，再感染組體重下降較成年期首次感染組明顯；細胞計數及分類計數：RSV感染后，成年期首次感染組BALF中的細胞總數、淋巴細胞較PBS對照組顯著增加；再感染組BALF中的細胞總數、嗜酸性細胞、中性粒細胞、淋巴細胞均顯著

3、高于PBS對照組，且細胞總數、嗜酸性細胞、中性粒細胞、淋巴細胞顯著高于成年期首次感染組；肺部病理：RSV感染后， 成年期首次感染組及再感染組的肺組織炎癥病理評分明顯高于PBS對照組，而再感染組明顯高于成年期首次感染組；細胞因子：RSV感染后第3天，再感染組BALF中的IFN-γ及IL-17A明顯高于PBS對照組及初次感染組。感染后第7天，成年期首次感染BALF中的IFN-γ較PBS對照組明顯增加，而IL-4、IL-5、IL-1

4、7A較PBS對照組無明顯變化；再感染組BALF中的IL-4、IL-5、IL-17A較PBS對照組顯著增加，而IFN-γ無明顯變化。
　　結論：RSV再感染后病情較初次感染進一步加重，嗜酸性粒細胞、中性粒細胞顯著升高，免疫應答為IL-4、IL-5等Th2類細胞因子與IL-17A升高，這與支氣管哮喘的炎癥特點相似，提示RSV反復感染可能導致支氣管哮喘的發(fā)生。
　　第二部分IFN-γ在斷乳期小鼠RSV初次再次感染后氣道炎癥和氣道高

5、反應性中的作用及其機制研究
　　目的：比較野生型及IFN-γ敲除C57BL/6鼠初次再次感染后氣道炎癥和氣道高反應性差異，并研究IFN-γ在RSV初次再次感染后氣道炎癥和氣道高反應性中的作用及其機制。
　　方法：雌性野生型及IFN-γ敲除小鼠隨機分為PBS對照組(3周PBS/8周PBS)、再次感染組(3周RSV/8周RSV)。再次感染RSV后檢測小鼠體重，再次感染后第3、7天，體積描計法檢測各組小鼠氣道高反應性，行支氣管肺泡

6、灌洗液( BALF)中細胞計數及分類計數；病理切片H&E染色后行肺組織炎癥病理評分；ELISA法檢測BALF中細胞因子（IL-4、IL-5、IL-13、IL-17A）的變化。
　　結果：體重變化：RSV感染后小鼠體重都明顯降低，野生型及敲除鼠RSV再感染組未見明顯差異。肺功能：僅敲除鼠RSV再感染組檢測到AHR，且明顯高于其他組。細胞計數及分類計數：在感染后第3、7天，野生型及敲除鼠再次感染組BALF中細胞總數、嗜酸細胞、中性粒細

7、胞、淋巴細胞都明顯高于相應的對照組，且敲除鼠再感染組高于野生型再感染組。肺部病理：野生型及敲除鼠再次感染組在RSV感染后第3、7天都存在明顯的炎癥細胞浸潤，且感染后第7天，敲除鼠再次感染組的病理評分明顯高于野生型。細胞因子：感染后第7天，野生型再感染組BALF中IL-4、IL-5、IL-17A較野生型對照組明顯增加；敲除鼠再感染組L-4、IL-5、IL-13、IL-17A較敲除鼠對照組明顯增加，且敲除鼠再次感染組BALF中IL-5明顯高