JMJD5相互作用蛋白的鑒定和N端功能的研究.pdf

1、JMJD5（又稱KDM8）是JmjC結(jié)構(gòu)域蛋白家族的一員。最新研究表明它可能在細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、胚胎發(fā)育、破骨細(xì)胞分化以及生物鐘節(jié)律調(diào)節(jié)中都有重要作用。JMJD5被報道具有去甲基酶及羥基化酶的功能，但目前關(guān)于其作用底物及調(diào)控機(jī)制的研究還十分有限。同時，JMJD5的JmjC結(jié)構(gòu)域位于C末端(270-416)，僅占全長的1/3，而其N端（占全長的2/3）大片區(qū)域的結(jié)構(gòu)和功能仍然未知。為深入研究JMJD5的生物學(xué)功能，我們首先運用免疫共沉淀(Co

2、-IP)聯(lián)合質(zhì)譜的檢測方法成功鑒定了38個與JMJD5有相互作用的蛋白，功能涉及細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、RNA加工、DNA復(fù)制、細(xì)胞周期調(diào)控、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、凋亡等多個方面，說明JMJD5可能參與了更廣泛的細(xì)胞內(nèi)分子事件。在這些相互作用蛋白中，我們還發(fā)現(xiàn)了核轉(zhuǎn)運相關(guān)分子Importinβ和transportin-1。進(jìn)一步研究表明JMJD5的N端含有經(jīng)典的核定位信號(NLS)(152-170)，可被Importinα/β核轉(zhuǎn)運系統(tǒng)識別，其N端的134-

3、152區(qū)域又能與核轉(zhuǎn)運蛋白transportin-1相互作用，兩者共同介導(dǎo)了JMJD5在細(xì)胞內(nèi)的核定位過程。而JMJD5的核定位功能更被發(fā)現(xiàn)是其能促進(jìn)Cyclin A1表達(dá)的必要條件。此外，我們還發(fā)現(xiàn)JMJD5的N端含有一個出核信號(NES)(34-38)，受轉(zhuǎn)運蛋白CRM-1的調(diào)節(jié)介導(dǎo)其出核。在對JMJD5相互作用蛋白的研究中，我們還發(fā)現(xiàn)JMJD5可與抑癌蛋白p53發(fā)生直接的相互作用。
　　深入研究表明JMJD5的N端可與p53