石油烴污染對(duì)海洋模式生物海膽的分子毒理效應(yīng)及機(jī)制研究.pdf

1、隨著各國(guó)對(duì)石油需求量的不斷增加，促使海上石油開(kāi)采業(yè)和運(yùn)輸業(yè)蓬勃發(fā)展，導(dǎo)致海上溢油事件頻繁發(fā)生，石油污染已嚴(yán)重威脅到海洋生態(tài)系統(tǒng)和海洋生物。本文選取了經(jīng)典的模式生物—馬糞海膽為研究對(duì)象，應(yīng)用環(huán)境化學(xué)、分子生物學(xué)等技術(shù)檢測(cè)石油烴污染對(duì)馬糞海膽的毒理效應(yīng)，探討污染物對(duì)海洋生物的損傷機(jī)制，為海上石油烴污染風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供依據(jù)。研究結(jié)論如下:
　　(1)海膽胚胎暴露在不同濃度的石油烴中的表現(xiàn)各不相同，在低濃度的石油烴影響下，表現(xiàn)出誘導(dǎo)效應(yīng)，但是

2、暴露濃度越大，抑制效果越顯著;不同暴露濃度對(duì)海膽胚胎的4種酶均有不同程度的影響，但是對(duì)于CAT和SOD的影響要明顯小于對(duì)GPx和GST的影響;石油烴對(duì)CAT、SOD、GPx及GST這4種酶活性的影響都很明顯，而囊胚期最為敏感。
　　(2)利用單細(xì)胞凝膠電泳技術(shù)(SCGE)研究石油烴對(duì)馬糞海膽管足DNA的損傷情況，研究結(jié)果表明:在油濃度為5、20、30、40 mg·L-1的影響下，都沒(méi)有發(fā)現(xiàn)DNA損傷，但是在油濃度為50 mg·L-

3、1時(shí)，發(fā)現(xiàn)了明顯的DNA損傷情況。該暴露濃度下，隨著暴露時(shí)間的增加，馬糞海膽管足細(xì)胞DNA損傷百分比、彗尾DNA百分含量和DNA平均遷移長(zhǎng)度都在增加。
　　(3)利用單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析技術(shù)(SNPS)研究石油烴對(duì)馬糞海膽體內(nèi)SPLOX、WNT8和HNF-6這三種基因的損傷情況，結(jié)果表明:SPLOX基因在編碼區(qū)第41位上發(fā)生堿基A-G的變化，而對(duì)應(yīng)的氨基酸則由賴(lài)氨酸變成精氨酸;WNT8基因在編碼區(qū)706位上T-C，對(duì)應(yīng)的氨基酸由苯丙

4、氨酸變?yōu)榱涟彼?HNF-6基因在編碼區(qū)1119位上G-C，對(duì)應(yīng)的氨基酸由絲氨酸變?yōu)樘K氨酸。利用高效液相色譜研究馬糞海膽在石油烴的影響下，體內(nèi)DNA甲基化的發(fā)生情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，暴露時(shí)間和甲基化程度二者呈正比關(guān)系。
　　(4)通過(guò)經(jīng)典的隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA技術(shù)(RAPD)研究了石油烴對(duì)馬糞海膽DNA的損傷情況，優(yōu)化了RAPD反應(yīng)的最佳條件并且探討了馬糞海膽的多態(tài)性，篩選最佳引物研究損傷情況。具體結(jié)果為:Taq酶、引物、dNTP濃度分別