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文檔簡介
1、目的:心肌蛋白質是心臟結構和功能的基礎,長期系統(tǒng)的運動訓練可使心肌結構和功能發(fā)生變化,這必然導致心肌蛋白質的表達量和質發(fā)生變化。本研究從蛋白質組學整體、定量的角度,探討SD大鼠在8周中小強度有氧運動條件下,右心室肌蛋白質組的差異表達及其規(guī)律,初步篩選出在運動應激條件下對心臟重塑發(fā)揮重要作用的目標蛋白質。為深入研究國民體質健康的運動干預,也為慢性心血管疾病的運動康復提供實驗依據(jù)。
方法:以20只雄性SD大鼠為研究對象,按照體
2、重隨機分為運動組和對照組(n=10)。運動組經(jīng)8周中小強度有氧運動跑臺訓練后6h,與對照組同時麻醉處死,提取右心室肌的全蛋白進行雙向凝膠電泳技術分離;運用Bio PD quest圖像分析軟件對雙向凝膠電泳圖譜進行分析,選取運動后差異表達量≥5倍的蛋白質點,用串聯(lián)飛行時間質譜蛋白質儀進行質譜鑒定,以逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)對目標蛋白質的基因表達進行mRNA轉錄水平上的檢測。
結果:經(jīng)過8周運動后,與對照組相比運動組
3、心臟重量指數(shù)增加32.0%,具有顯著性差異(p<0.05)。2-DE圖譜上8周運動組和對照組檢測到的蛋白質點分別為547±18和530±14個;運動后共有58個蛋白質點發(fā)生了變化,其中表達量上調≥2倍的點有33個,上調≥5倍的點有8個,下調≥2倍的點有25個,下調≥5倍的點有8個。選擇差異表達量≥5倍的16個點為目標蛋白質進行質譜分析,共鑒定出11個蛋白質,這些目標蛋白質點有:心肌肌動蛋白α1運動后表達量上調9.5倍、膜聯(lián)蛋白A6運動后
4、表達量上調5.4倍、丙酮酸脫氫酶E1α1運動后表達量上調5.3倍、原肌球調節(jié)蛋白4運動后表達量上調5.5倍、蛋白組氨酸磷酸酶運動后表達量上調9.6倍、次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶運動后表達量下調9.7倍、線粒體羧甲基烯酰-CoAβ鏈運動后表達量下調14.6倍、線粒體電子轉移黃素蛋白β亞基運動后表達量下調16.1倍、線粒體酰基輔酶脫氫酶長鏈運動后表達量下調16.7倍、線粒體烏頭酸水合酶運動后表達量下調11.3倍和一個分子量29kDa的未知
5、蛋白運動后表達量上調5.3倍。逆轉錄聚合酶鏈檢測結果顯示:膜聯(lián)蛋白A6、心肌肌動蛋白α1、蛋白組氨酸磷酸酶、線粒體羧甲基烯酰-CoAβ鏈、次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉移酶、線粒體酰基輔酶脫氫酶長鏈的mRNA表達量出現(xiàn)下降;線粒體烏頭酸水合酶、原肌球調節(jié)蛋白4的mRNA的表達量出現(xiàn)上升。
結論:①經(jīng)過8周中小強度有氧運動后,大鼠右心室肌蛋白質組發(fā)生了顯著性差異表達。②采用中小強度有氧運動,心肌收縮能力增強,能量代謝水平和鈣離子調
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