組蛋白和乙酰化蛋白的分離分析.pdf

1、蛋白質(zhì)翻譯后修飾(Post-translational modifications，PTMs)參與各種生理過(guò)程的調(diào)節(jié)，與疾病的發(fā)生、發(fā)展密切聯(lián)系，是新一代疾病診斷標(biāo)志物和藥物作用靶點(diǎn)。組蛋白(Histone)是一組構(gòu)成染色體基本單元的蛋白質(zhì)，其N端尾部具有大量的翻譯后修飾，這些修飾參與基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控，已被認(rèn)為是重要的表觀遺傳信息，對(duì)揭示疾病機(jī)理具有重要意義。然而由于其修飾構(gòu)成復(fù)雜且動(dòng)態(tài)變化，全面、精確地鑒定這些修飾十分困難。組蛋白的分離作

2、為其鑒定的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，目前仍缺乏快速、有效的方法。
　　蛋白質(zhì)賴氨酸乙?；?Protein lysine acetylation，Kac)是一種動(dòng)態(tài)、可逆的翻譯后修飾。近年來(lái)，人們對(duì)賴氨酸乙?；墓δ苡辛巳碌恼J(rèn)識(shí)，生物醫(yī)學(xué)研究表明:蛋白賴氨酸修飾不僅參與基因轉(zhuǎn)錄，而且在能量代謝調(diào)控、細(xì)胞凋亡等多種重要的生理過(guò)程中具有調(diào)控功能，作為特殊的蛋白修飾組，其分離分析以及生物信息的解析目前備受關(guān)注。
　　本論文共分兩部分:
　　

3、第一部分，我們以組蛋白H4為目標(biāo)，基于適配體對(duì)其特異性識(shí)別，制備了富集材料，發(fā)展了一種組蛋白H4的分離富集新方法，并研究了材料基質(zhì)、洗脫液組成、濃度以及溫度等因素的影響，通過(guò)條件優(yōu)化，實(shí)現(xiàn)了復(fù)雜體系下組蛋白H4的快速和高效的富集。研究結(jié)果表明:適配體在目標(biāo)蛋白富集方面具有潛力，本方法的建立有利于組蛋白表觀遺傳修飾鑒定的相關(guān)研究。
　　第二部分，針對(duì)蛋白質(zhì)賴氨酸乙?；揎?，結(jié)合當(dāng)前這一領(lǐng)域分析方法的發(fā)展，建立了基于抗體親和富集和高分