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文檔簡(jiǎn)介
1、基因治療的關(guān)鍵就是選擇安全有效的載體,非病毒載體因毒性低,生物相容性好,制備容易等一些優(yōu)點(diǎn),逐漸取代病毒載體,具有廣闊的應(yīng)用前景。
本文設(shè)計(jì)合成了兩個(gè)肽類(lèi)陽(yáng)離子類(lèi)脂,其極性頭部分別為甘氨酸和甘氨酸二肽,產(chǎn)品重結(jié)晶后,經(jīng)過(guò)ESI-MS、1H NMR、13C NMR、IR和LC表征,結(jié)構(gòu)準(zhǔn)確,純度較高,可以滿(mǎn)足基因轉(zhuǎn)染。將所合成的類(lèi)脂制成陽(yáng)離子脂質(zhì)體,通過(guò)透射電鏡分析檢測(cè),脂質(zhì)體分布較均勻,粒徑大小分布在50-200nm之間,可應(yīng)
2、用于基因轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
通過(guò)延滯實(shí)驗(yàn)考察脂質(zhì)體與DNA的結(jié)合能力,結(jié)果表明,脂質(zhì)體與DNA的結(jié)合能力隨著脂質(zhì)體/DNA比例的增大而增加;極性頭部為甘氨酸二肽的陽(yáng)離子脂質(zhì)體與DNA結(jié)合能力強(qiáng)于頭部為氨基酸的陽(yáng)離子脂質(zhì)體;助類(lèi)脂DOPE的加入可以提高脂質(zhì)體與DNA的結(jié)合能力。
利用所制備的陽(yáng)離子脂質(zhì)體作為基因運(yùn)載工具,轉(zhuǎn)運(yùn)質(zhì)粒pGFP-N2,對(duì)Hep-2細(xì)胞株進(jìn)行了體外轉(zhuǎn)染,研究了肽類(lèi)陽(yáng)離子類(lèi)脂結(jié)構(gòu)與其轉(zhuǎn)染效率之間的關(guān)系。結(jié)
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