

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、植物中依賴RNA的RNA聚合酶(RDRs)是個大家族,主要通過基因沉默途徑參與植物的生長發(fā)育調(diào)節(jié)、逆境表達以及表觀遺傳修飾等多種生物學過程,而依賴RNA的RNA聚合酶6(RDR6)及依賴RNA的RNA聚合酶1(RDR1)是其家族中的重要組分,已經(jīng)被鑒定出來具有獨特的功能。本研究從大豆中分離出了兩個RDR6基因和一個RDR1基因,分別被命名為GmRDR6a、GmRDR6b以及GmRDR1基因,通過對這三個基因序列進行生物信息學分析以及基因
2、表達特性分析,初步判斷其功能,以期為這些基因的進一步研究奠定基礎(chǔ)。
本研究利用同源克隆的方法從大豆品種‘科豐一號’中分離出2個RDR6基因,分別將其命名為GmRDR6a和GmRDR6b基因,并對其進行序列分析,植物組織表達分析、抗逆境脅迫表達分析、亞細胞定位分析及構(gòu)建植物過量表達載體。結(jié)果表明GmRDR6a基因位于大豆基因組的6號染色體上,基因全長為4389 bp,包含一個長度為744 bp的內(nèi)含子,其ORF長度為3615bp
3、,編碼1204個氨基酸,相對分子量和等電點分別為297.5103和4.86; GmRDR6b基因位于大豆基因組的4號染色體上,基因全長為4002 bp,包含一個長度為387 bp的內(nèi)含子,其ORF長度為3615 bp,編碼1204個氨基酸,相對分子量和等電點分別為296.89103和4.86; GmRDR6a和GmRDR6b都含有RDRs家族的保守序列‘DLDGD’;2個基因在所有被檢測組織中均表達,并且在花中的表達量最高;熒光定量結(jié)果
4、發(fā)現(xiàn):在大豆花葉病毒(Soybean MosaicVirus,SMV)處理下,2個基因在抗病材料‘科豐一號’中的表達量均顯著高于感病材料‘南農(nóng)1138-2’,在非生物脅迫下,GmRDR6a基因在鹽、干旱處理下根、莖、葉組織中的表達量均提高,其中鹽處理下根中的表達量最高,ABA誘導條件下出現(xiàn)早期響應(yīng),冷害處理下該基因的表達量沒有明顯變化;GmRDR6b基因在鹽、ABA處理下,表達量很高,冷害處理下出現(xiàn)早期響應(yīng),在干旱條件下,該基因表達趨勢
5、不明顯;因此,判斷這兩個基因參與大豆抗性反應(yīng),其抗性機理有待進一步研究。構(gòu)建這兩個基因的融合表達載體,通過農(nóng)桿菌介導法轉(zhuǎn)入洋蔥表皮細胞進行亞細胞定位,發(fā)現(xiàn)這兩個基因均定位在細胞核上,可見其主要在細胞核內(nèi)發(fā)揮功能;分別構(gòu)建這兩個基因的過量表達載體pMDC83-GmRDR6a以及pMDC83-GmRDR6b,為探究GmRDR6a和GmRDR6b基因在大豆抗病中的分子機理打下基礎(chǔ)。
另外本研究從大豆品種‘科豐一號’中分離出1個新的G
6、mRDR1基因,并對其進行序列分析、組織表達分析、抗逆境脅迫表達分析及該基因的亞細胞定位和過量表達載體構(gòu)建研究。試驗后發(fā)現(xiàn)GmRDR1基因位于大豆基因組的2號染色體上,該基因全長為3956 bp,其中ORF為3378 bp,編碼1125個氨基酸,相對分子量和等電點分別為279.72103和4.63;GmRDR1含有RDRs家族的保守序列‘DLDGD’;該基因在所有被檢測組織中均表達,并且在葉中的表達量最高;熒光定量結(jié)果發(fā)現(xiàn):在大豆花葉病
7、毒(Soybean Mosaic Virus,SMV)處理下,GmRDR1在抗病材料‘科豐一號’中的表達量顯著高于感病材料‘南農(nóng)1138-2’,鹽脅迫條件下,該基因在莖、葉中的表達量明顯升高,且在24 h表達量達到最高值;該基因在根中的表達量6h出現(xiàn)短暫升高,而后表達量呈現(xiàn)下降趨勢,干旱脅迫處理后48 h之內(nèi),GmRDR1基因在根、莖、葉中的表達量均升高,在根、莖、葉中分別于6h、48 h、24 h表達量達到最高,該基因在莖中的表達量呈
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 棉花RNA依賴的RNA聚合酶6(GhRDR6)基因的分離及功能分析.pdf
- 心葉煙RNA依賴的RNA聚合酶基因(NgRDR1)的克隆及其表達特性研究.pdf
- 心葉煙RNA依賴的RNA聚合酶6(NgRDR6)基因的分離及功能分析.pdf
- 棉花RNA依賴的RNA聚合酶(GhRdRP)基因的分離及功能分析.pdf
- 菊花RNA聚合酶Ⅱ CTD磷酸酶1基因(CmCPL1)的克隆與功能鑒定.pdf
- SARS冠狀病毒RNA依賴的RNA聚合酶原核和真核表達及純化.pdf
- 細絲蛋白A介導的RNA聚合酶Ⅲ基因轉(zhuǎn)錄機制的研究.pdf
- 人rna聚合酶ⅲ抗體rnapⅲab酶聯(lián)免疫分析
- RNA聚合酶I介導轉(zhuǎn)錄的TBSV病毒表達載體研究.pdf
- 人類RNA聚合酶Ⅱ啟動子識別研究.pdf
- 穩(wěn)定表達T7 RNA聚合酶的ST細胞系的建立.pdf
- RNA聚合酶Ⅱ介導的FCV反向遺傳操作系統(tǒng)的建立及RHDV VP60基因的表達.pdf
- 痘苗病毒-T7 RNA聚合酶輔助的原核基因在真核細胞中的表達.pdf
- RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄的ALU對細胞凋亡及HBV復制的影響.pdf
- H5N1病毒RNA聚合酶PAc-PB1n蛋白的表達純化及晶體篩選.pdf
- HMGB1在RNA聚合酶Ⅲ識別poly(da-dT)中的作用及機制.pdf
- 綿羊痘病毒GY株的分離鑒定及靶向其RNA聚合酶基因siRNA的篩選.pdf
- 流感病毒反向遺傳的RNA聚合酶Ⅰ-Ⅱ系統(tǒng)的構(gòu)建研究.pdf
- 玉米RNA聚合酶Ⅲ識別的啟動子活性鑒定與Waxy1基因編輯.pdf
- 丙型肝炎病毒NS5B RNA聚合酶抑制性多肽篩選.pdf
評論
0/150
提交評論