高效液相色譜使用指南_第1頁(yè)
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1、e高效液相色譜知識(shí)收藏高效液相色譜知識(shí)收藏Agilent1100高壓液相色譜儀基本操作步驟Agilent1100液相基本操作步驟Agilent1100高壓液相色譜儀維護(hù)保養(yǎng)知識(shí)保養(yǎng)事項(xiàng):高壓液相色譜HPLC常見(jiàn)故障及排除方法液相色譜柱使用及保養(yǎng)高壓液相色譜HPLC培訓(xùn)教程(一)高壓液相色譜HPLC培訓(xùn)教程(七)高效液相色譜儀中反相HPLC柱子的清潔和再生HPLC對(duì)流動(dòng)相的基本要求高效液相色譜Waters600E2487HPLC系統(tǒng)SOP

2、Waters高效液相色譜系統(tǒng)操作規(guī)程高效液相色譜儀(Agilent1100)操作注意事項(xiàng)色譜掃盲班36、VWD檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定:●在”Wavelength”下方的空白處輸入所需的檢測(cè)波長(zhǎng)如254nm在”Peakwidth(Responsetime)”下方點(diǎn)擊下拉式三角框選擇合適的響應(yīng)時(shí)間如0.1min(2s)?!裨赥imetable中可以“”一行,輸入隨時(shí)間切換的波長(zhǎng),如1min,波長(zhǎng)=300nm。點(diǎn)擊ok進(jìn)入下一畫面。7、DAD檢測(cè)器參

3、數(shù)設(shè)定:●檢測(cè)波長(zhǎng):254nmBW=30nm參比波長(zhǎng)=350nmBW=100nm●檢測(cè)波長(zhǎng):一般選擇最大吸收處的波長(zhǎng)。樣品帶寬BW:一般選擇最大吸收值一半處的整個(gè)寬度。參比波長(zhǎng):一般選擇在靠近樣品信號(hào)的無(wú)吸收或低吸收區(qū)域。參比帶寬BW:至少要與樣品信號(hào)的帶寬相等,許多情況下用100nm作為缺省值。Peakwidth(Responsetime):其值盡可能接近要測(cè)的窄峰峰寬。Slit—狹縫窄,光譜分辨率高;寬時(shí),噪音低。同時(shí)可以輸入采集光

4、譜方式,步長(zhǎng),范圍,閾值。選中所用的燈?!顸c(diǎn)擊Ok進(jìn)入下一畫面。8、RID檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定:●色譜條件:進(jìn)樣體積:20ul。光學(xué)單元溫度:Off。極性:正。峰寬(響應(yīng)時(shí)間):4s。●“OpticalUnitTemperature”若環(huán)境溫度控制在2℃設(shè)定為Off若環(huán)境溫度不穩(wěn)定則設(shè)定光學(xué)單元溫度為高于環(huán)境溫度5度以防樣品在池中沉淀。“Peakwidth”大多數(shù)分析設(shè)為4S,只有在高速分析下設(shè)為更短?!癆utomaticrecyclinga

5、fteranalysis”在不進(jìn)行分析時(shí)可以讓流動(dòng)相循環(huán),節(jié)省流動(dòng)相,檢測(cè)器連續(xù)運(yùn)行,可隨時(shí)投入使用。●點(diǎn)擊RID圖標(biāo),選擇RIDControl:Heater設(shè)為On,若要循環(huán)流動(dòng)相,必須將“RecyclingValve”設(shè)為ON。手動(dòng)purge參比池,將其設(shè)為On,并輸入Purge時(shí)間。9、FLD檢測(cè)器參數(shù)設(shè)定:色譜條件:●樣品:PN0101868704用甲醇稀釋為1:10。●進(jìn)樣體積:5ul。●柱溫箱:30℃。EX=246nmEM=

6、317nmPMT=10。●響應(yīng)時(shí)間=4s.停止時(shí)間:出峰完畢。●ExcitationA:激發(fā)波長(zhǎng):200700nm步長(zhǎng)為1nm或Zeroder?!馝mission:發(fā)射波長(zhǎng):280900nm步長(zhǎng)為1nm或Zeroder。●PMT:大多數(shù)應(yīng)用適當(dāng)?shù)脑O(shè)定值為10若高濃度樣品峰被切平頭則減少PMT值?!瘛癙eakwidth”:大多數(shù)應(yīng)用設(shè)為4s,只有快速分析采用小的設(shè)定值。●MultiEx:多波長(zhǎng)及光譜(激發(fā))。●MultiEm:多波長(zhǎng)及光譜

7、(發(fā)射)?!裢瑫r(shí)可以輸入范圍Range、步長(zhǎng)step、采集光譜。10、在“Runtimechecklist”中選中“Dataacquisition”,單擊Ok。11、單擊“Method”菜單,選中“Savemethodas”,輸入一方法名,如“test”,單擊Ok。12、從菜單“View”中選中”O(jiān)nlinesignal”選中Windows1然后單擊Change鈕將所要繪圖的信號(hào)移到右邊的框中點(diǎn)擊Ok.(如同時(shí)檢測(cè)二個(gè)信號(hào)則重復(fù)12選中

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