右旋磷霉素生物轉化菌篩選方法的建立與應用.pdf

1、左旋磷霉素是一種小分子極性抗生素，1969年發(fā)現于弗氏鏈霉菌(Streptomyces fradiae)發(fā)酵液中，其化學結構簡單、抗菌機制獨特、對革蘭陽性與陰性菌均有作用?，F今，左旋磷霉素已經實現化學工業(yè)合成。右旋磷霉素是在左旋磷霉素化學工業(yè)生產過程中產生的無臨床活性的對映異構體，并隨著左旋磷霉素的大規(guī)模工業(yè)生產而近乎1:1的產生。右旋磷霉素的排放主要分為制藥廢水排放與固體堆放，由于制藥廢水中右旋磷霉素濃度較低、成分復雜，因此更適宜將其

2、無害化降解，從而實現對環(huán)境的修復，而堆放在庫房當中的固體右旋磷霉素總量大、純度高。因此更適宜將其手性生物轉化為左旋磷霉素，從而提高生產效益。
　　本文針對上述兩種應用目的，建立了右旋磷霉素生物轉化菌篩選方法，包括了TLC-OD570法和α-右旋苯乙胺沉淀法。其分別應用于右旋磷霉素降解菌的篩選與右旋磷霉素手性轉化菌的篩選。同時，對兩種方法進行優(yōu)化和精確度、重復性、穩(wěn)定性的測定以及標準曲線的繪制。
　　本文從不同的環(huán)境中采集樣品

3、，篩選得到右旋磷霉素耐受菌株476株，以此作為右旋磷霉素生物轉菌株的篩選來源。基于耐受菌株以及構建的檢測方法，對具有右旋磷霉素耐性的菌株進行篩選。篩選得到20株右旋磷霉素降解菌和1株右旋磷霉素手性轉化菌。對具有高效降解右旋磷霉素的菌株A68-32進行UV誘變選育，得到突變株UV-35，對右旋磷霉素的耐受性提高了1.5倍，降解效率提高26.1％，7d對1.0％的右旋磷霉素降解率達87.9％。在1.0％的右旋磷霉素培養(yǎng)基中進行7天發(fā)酵，右旋