項(xiàng)目6疫苗生產(chǎn)技術(shù)

1、教學(xué)安排,1. 員工培訓(xùn) 由老師講解病毒疫苗生產(chǎn)的理論基礎(chǔ)及應(yīng)用范圍。 分配實(shí)操任務(wù)：病毒疫苗(用動(dòng)物病毒模擬)的生產(chǎn)。,2. 學(xué)生模擬組建運(yùn)營(yíng)一個(gè)病毒疫苗生產(chǎn)企業(yè)，撰寫計(jì)劃書(在理論教學(xué)期間完成)。 市場(chǎng)部：病毒疫苗的種類和用途，市場(chǎng)狀況，選擇生產(chǎn)的細(xì)菌疫苗品種，做市場(chǎng)銷售預(yù)測(cè)。 技術(shù)部：確定病毒疫苗生產(chǎn)的工藝流程及工藝參數(shù)，編制生產(chǎn)操作規(guī)程，確定生產(chǎn)車間的

2、布局。,品控部：制定所生產(chǎn)的病毒疫苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，生產(chǎn)取樣分析操作規(guī)程，質(zhì)量檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和操作規(guī)程。 總經(jīng)理：協(xié)調(diào)監(jiān)督各部工作，最后拿出完整的計(jì)劃書。,3. 計(jì)劃書實(shí)施。 計(jì)劃書要先經(jīng)過老師的審核，然后實(shí)施。 實(shí)施過程中考核操作技能。 實(shí)施后及時(shí)進(jìn)行實(shí)訓(xùn)報(bào)告的撰寫也總結(jié)。,病毒疫苗的一般制造方法,,一　病毒類疫苗的制造方法,1　毒種的選擇與減毒毒株須具備

3、的條件：（1）持有特定的抗原性；（2）有典型的形態(tài)和感染特定組織的特性，并能保持其生物學(xué)特性；（3）易在特定組織中大量繁殖；（4）不產(chǎn)生神經(jīng)毒素或能引起機(jī)體損害的其它毒素；,,（5）如制備活疫苗，繁殖過程中無恢復(fù)原致病性的現(xiàn)象；（6）未被其它病毒污染。2　病毒的繁殖（1）活體動(dòng)物培養(yǎng)（2）雞胚培養(yǎng)（3）組織培養(yǎng),,（4）細(xì)胞培養(yǎng)；細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要控制：①　常用的維持液和生長(zhǎng)液　　需要氨基酸、輔酶、維生素、葡萄糖和

4、無機(jī)鹽等。② 培養(yǎng)條件控制a pH值：7.0±0.2；b CO2提供：通過保持環(huán)境CO2分壓5%，控制pH。,,c 氧的提供：通氧；d 容器內(nèi)壁潔凈度控制：用硫酸－鉻酸混合液洗滌，后用純水沖洗；e 細(xì)菌污染控制：徹底滅菌，加入一定量抗生素；f 培養(yǎng)溫度和時(shí)間控制：37±1℃，時(shí)間2－4天。,,3　疫苗的滅活　　用甲醛或酚溶液滅活?！　?dòng)物組織對(duì)滅活效果有影響；滅活時(shí)間要合適。4　疫苗純化　　細(xì)胞

5、培養(yǎng)換液即可。,,5　凍干　　凍干的疫苗充氮或真空密封保存。,重要的病毒類疫苗生產(chǎn)工藝,一、甲型肝炎減毒活疫苗歷史： 絨猴肝內(nèi)復(fù)制； 細(xì)胞培養(yǎng)未經(jīng)純化； 細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)純化。,,二　乙型肝炎疫苗　　HBsAg抗原具有較強(qiáng)的免疫原性，可制備疫苗，用酵母表達(dá)系統(tǒng)。,,三　流行性乙型腦炎疫苗　　11-15日齡地鼠腎經(jīng)胰酶消化，用大立瓶6-8r/h培養(yǎng)3d，用生理鹽水充分洗滌，加入維持液，接入毒株

6、鼠腦懸液，待病變達(dá)+++，第一次收液。細(xì)胞良好，待病變達(dá)++++作第二次收液。收液作毒力滴定與無菌實(shí)驗(yàn)，加入福爾馬林，22℃恒溫滅活8d。,六　白喉類毒素,1　菌種及培養(yǎng)基　　菌種：第8號(hào)菌株?！　∨囵B(yǎng)基：改良馬丁培養(yǎng)基，保浦氏培養(yǎng)基，改良林氏培養(yǎng)基。2　培養(yǎng)　　多用深層培養(yǎng)。,作業(yè)：,1　簡(jiǎn)述病毒類疫苗制造方法。2　如何生產(chǎn)甲型肝炎疫苗？3　如何生產(chǎn)脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗？4　如何生產(chǎn)流感疫苗？5 如何生產(chǎn)狂犬疫