pbl乳腺癌 ppt課件

1、乳腺癌,第三小組成員： 曾明潔、李青林、陳柏岑、 李梓杏、李競坤、曾小文,目的要求,,1、癌基因與抑癌基因的概念及作用機制,癌基因 概念,,,癌基因是一類會引起細胞癌變的基因。其實，原癌基因有其正常的生物學功能，主要是刺激細胞正常的生長，以滿足細胞更新的要求。只是當原癌基因發(fā)生突變后，才會在沒有接收到生長信號的情況下仍然不斷地促使細胞生長或使細胞免于死亡，最后導致細胞癌變?？茖W界研究發(fā)現，血硒水平的高低與癌的發(fā)生息息相關。大量的

2、調查資料說明，一個地區(qū)食物和土壤中硒含量的高低與癌癥的發(fā)病率有直接關系。目前癌癥治療中使用硒輔助治療十分普遍。常用的補硒制劑有新稀寶、硒維康等。,癌基因 作用機制,,,一 、獲得啟動子與增強子。 當逆轉錄病毒的長末端重復序列（含強啟動子和增強子）插入原癌基因附近或內部時，啟動下游基因的轉錄，導致癌變。二 基因易位—染色體易位重排。 導致原來無活性的原癌基因移至強啟動子或增強子附近而活化。三 原癌基因擴增。 原癌因擴增

3、是原癌基因數量的增加或表達活性的增加，產生過量的表達蛋白也會導致腫瘤的發(fā)生。四 點突變。 原癌基因在射線或化學致癌劑作用下，可能發(fā)生單個堿基的替換——點突變，從而改變了表達蛋白的氨基酸組成，造成蛋白質結構的變異,抑癌基因 概念,,,也稱為抗癌基因。正常細胞中存在基因，在被激活情況下它們具有抑制細胞增殖作用，但在一定情況下被抑制或丟失后可減弱甚至消除抑癌作用的基因。正常情況下它們對細胞的發(fā)育、生長和分化的調節(jié)起重要作用,抑癌基

4、因 作用機制,,,其功能是抑制細胞周期，阻止細胞數目增多以及促使細胞死亡。通常是一對等位基因均告缺失或都因突變而失去活性時，細胞發(fā)生癌變，此時缺失或突變的基因一般就是抑癌基因。因此，抑癌基因反映了基因的功能丟失。抑癌基因原先有對細胞分裂周期或細胞生長設置限制的功能，當抑癌基因的一對等位基因都缺失或都失去活性時，這種限制功能也就隨之丟失，于是出現了細胞癌變。抑癌基因與癌基因之間的區(qū)別在于癌基因只要有一個等位基因發(fā)生突變時就可引起癌變，而抑

5、癌基因只要有一個等位基因是野生型時，就可抑制癌變。目前已發(fā)現的抑癌基因有10多種。,2、BRAC1和BRAC2的特點和作用機理,BRAC1和BRAC2基因結構,BRAC1的特點,,,單擊輸入內容,BRCA1定位于人類17號染色體q21。以常染色體顯性遺傳方式遺傳，并有很高的外顯率。BRCA1長約100 kb，含24個外顯子。其基因產物是1863個氨基酸所構成的磷酸化蛋白質，相對分子量約200000。,,BRAC2的特點,,,BRCA2

6、基因在1994年由Wooster等發(fā)現，定位于13號染色體q12。全基因組DNA長約70kb，其中編碼區(qū)含有10987bp，且富含AT（約64％），其基因序列與BRCA1無明顯關系。BRCA2由27個外顯子組成，其中第11個外顯子長約4932bp，mRNA長約10.2kb，編碼的BRCA2蛋白含3418個氨基酸。,BRAC2的作用機理,,,正常BRCA2蛋白位于細胞核內,參與DNA 的修復。在細胞周期的擴增期的表達方式和BRCA1相似,

7、即在靜止期的細胞中檢測不到該基因的轉錄。在快速增殖的細胞中BRCA2 mRNA的表達明顯增多,且表現出細胞周期依賴性,在G0期和G1早期是低的,在G1/S期分界時達到高峰。這些結果表明BRCA2對于細胞生長的調節(jié)有著重要作用。許多研究表明：BRCA2蛋白與遺傳性乳腺癌、卵巢癌及范康尼氏貧血癥的發(fā)生具有密切關系，猜測其與雙鏈DNA損傷修復有關，但具體作用模式與機制仍不清楚。,3、細胞信號轉導,細胞信號轉導,,,在多細胞生物中，細胞與細胞之

8、間的相互溝通除直接接觸外，更主要的是通過內分泌、旁分泌和自分泌一些信息分子來進行協調。細胞通過位于胞膜或胞內的受體感受胞外信息分子的刺激，經復雜的細胞內信號轉導系統(tǒng)的轉換而影響其生物學功能，這一過程稱為細細胞信號轉導(cellular signal transduction)，這是細胞對外界刺激做出應答反應的基本生物學方式。,細胞信號轉導的基本步驟,信息物質,,(一)細胞間信息物質：,（二）細胞內信息物質:,凡由細胞分泌的調節(jié)細胞生命

9、活動的化學物質。,主要包括：蛋白質、肽類、氨基酸及其衍生物、類固醇激素、氣體分子NO、CO等。,在細胞內傳遞細胞調控信號的化學物質。,,主要包括：無機離子、脂類衍生物、糖類衍生物、核苷酸等。,,細胞信號的種類,（1）cAMP-蛋白激酶A途徑（2）Ca2+ -依賴性蛋白激酶途徑 （3）cGMP蛋白激酶途徑（4）酪氨酸蛋白激酶途徑（5）Notch信號轉導途徑（6）核因子κB途徑（7）TGF-β途徑（8）胞內受體介導的信息傳遞

10、,,信號轉導途徑,補充：信號轉導途徑,受體的分類（位置）,（一）膜受體存在于細胞質膜上的受體，稱為膜受體。絕大多數是糖蛋白，少數是糖脂配體（生長因子、細胞因子、水溶性激素分子、黏附分子等）根據其結構和轉換信號的方式分為三類1. 環(huán)狀受體 2. 七次跨膜α螺旋受體 3. 單次跨膜螺旋受體（二）細胞內受體根據在細胞中的分布情況，胞內受體又可分為胞質受體和核受體 ，多為DNA結合蛋白。多是反式作用因子，當與相應的配體結合后，可

11、與DNA的順式作用元件結合，調節(jié)基因轉錄。配體（類固醇激素、甲狀腺素、維甲酸等）,,,1、環(huán)狀受體(配體閘門通道),功能：主要在神經沖動傳遞中起作用。神經遞質與該類受體結合,使離子通道打開或關閉。在實現離子的跨膜轉運的同時實現了化學信號的轉導。,又稱配體依賴型離子通道（ligand-gated ion channel）是一類自身為離子通道的受體，主要存在于神經、肌肉等可興奮細胞，信號分子為神經遞質：如N-乙酰膽堿受體等。這類受體常由5

12、個亞單位組成,G蛋白偶聯受體(G-protein coupled receptors, GPCR ）作為人類基因組編碼的最大類別膜蛋白超家族，有800多個家族成員，與人體生理代謝幾乎各個方面都密切關聯。它們的構象高度靈活，調控非常復雜，天然豐度很低。配體：腎上腺素、異高血糖素等激素、嗅覺、視覺、味覺等,2、七次跨膜受體（seven-helix receptor）,特點：七次跨膜受體與相應的配體結合后，觸發(fā)受體蛋白的構象改變，后者再進

13、一步調節(jié)G蛋白的活性，激活AC(或磷脂酶C)，使細胞內產生第二信使。故這類受體也稱為G蛋白耦聯受體（G protein-coupled receptor，GPCR）。,激素與受體結合,細胞膜上的酶活化（AC 等）,胞質內第二信使?jié)舛仍黾?,,,,促進蛋白激酶活性，產生生物學效應（細胞代謝、基因轉錄的調控）,結構:含1條肽鏈的糖蛋白,N端在細胞膜外側,C端在細胞膜內側,中段是7個跨膜螺旋結構，受體的第3個環(huán)可與G蛋白耦聯 。,信息傳遞步驟

14、：,受體蛋白的構象改變調節(jié)G蛋白的活性,,一條肽鏈糖蛋白,3、單次跨膜螺旋受體,分類（受體結構的差別）：（1）酪氨酸蛋白激酶受體（2）非催化型單個跨膜受體/細胞因子受體（3）蛋白絲氨酸和蘇氨酸激酶受體 （4）鳥苷酸環(huán)化酶活性的受體,,結構：是由1條多肽鏈構成的跨膜糖蛋白，N端位于質膜外，是配體的結合部位，C端位于胞質內，本身具有激酶功能區(qū)域可與蛋白激酶偶聯而表現出酶活性。,（1）酪氨酸蛋白激酶受體（TPK receptor ）

15、,結構：是由1條多肽鏈構成的跨膜糖蛋白N端位于質膜外，是配體的結合部位，跨膜區(qū)域近膜結構域酪氨酸蛋白激酶結構域C端位于胞質內,,使底物磷酸化，與細胞的增殖、分化、癌變有關。,配體受體結合,受體蛋白質構象改變,（存在自身磷酸化位點，調節(jié)酪氨酸激酶活性）,,,配體:胰島素(insulin)表皮生長因子(EGF)血小板衍生生長因子(PDGF)神經生長因子(NGF)成纖維細胞生長因子(FGF)血管內皮生長因子(VEGF),

16、,功能：,（二）細胞核受體結構特征,胞內受體通常為由400～1000個氨基酸組成的單體蛋白，包括四個區(qū)域：①高度可變區(qū)：位于N末端的氨基酸序列高度可變，長度不一，具有轉錄激活功能。②DNA結合區(qū)：其DNA結合區(qū)域由66～68個氨基酸殘基組成，富含半胱氨酸殘基，具兩個鋅指結構，由此可與DNA結合。③鉸鏈區(qū)：為一短序列，可能有與轉錄因子相互作用和觸發(fā)受體向核內移動的功能。④激素結合區(qū)：位于C末端，由200～250個氨基酸殘基組成，是

17、配體結合的區(qū)域，這一區(qū)域對于受體二聚化及轉錄激活也有重要作用。,圖—胞內受體,4、EGFR家族,EGFR家族成員,,,1．EGFR家族，又稱為EGFR酪氨酸激酶家族，由4個不同的受體酪氨酸激酶組成，分別為：a)EGFR（HER-1/ErbB-1）：廣泛分布于除血管組織外的上皮細胞膜上。b)ErbB-2（HER2/neu）：在正常人體腔上皮、腺上皮及胚胎中均有普遍的微弱表達。c)ErbB-3（HER3）：在除造血系統(tǒng)外的多數部位有表

18、達。d)ErbB-4（HER4）：在除腎小球及周圍神經外的所有成年組織中均可檢測到其表達。,EGFR家族的組成和結構特點,,,EGFR定位于細胞膜上，由胞外的配體結合區(qū)、疏水跨膜結構域和胞內酪氨酸激酶區(qū)三部分構成。a)胞內結構包含1個酪氨酸激酶域和多個自身磷酸化位點。b)膜外區(qū)域由配體結合位點和2個富含半胱氨酸的區(qū)域夠成，能結合具有激動功能的多種配體。主要配體有EGF和轉換生長因子（transforminggrowthfactor

19、-α，TGF-α）。,EGFR家族的組成和結構特點,,,EGF和TGF-α與EGFR結合后，EGFR形成二聚體，結合1個ATP分子，激活EGFR自身酪氨酸激酶活性，使胞內自身磷酸化位點，從而激活下游的Ras-Raf-MAPK（mitogen-activated-protein-kinase,MAPK）級聯系統(tǒng)和磷酸肌醇激酶（phosphoinositolkinase）系統(tǒng)，成為下游信號轉導的親和位點，與多種參與有絲分裂的信號轉導分子產生

20、高親和，通過這些信號轉導系統(tǒng)將有絲分裂信號從細胞外傳遞到細胞內，從而有效調節(jié)細胞3對外界的刺激反應、細胞增殖、存活、黏附、遷移和分化等。,EGFR家族的組成和結構特點,,,EGF和TGF-α與EGFR結合后，EGFR形成二聚體，結合1個ATP分子，激活EGFR自身酪氨酸激酶活性，使胞內自身磷酸化位點，從而激活下游的Ras-Raf-MAPK（mitogen-activated-protein-kinase,MAPK）級聯系統(tǒng)和磷酸肌醇激

21、酶（phosphoinositolkinase）系統(tǒng)，成為下游信號轉導的親和位點，與多種參與有絲分裂的信號轉導分子產生高親和，通過這些信號轉導系統(tǒng)將有絲分裂信號從細胞外傳遞到細胞內，從而有效調節(jié)細胞3對外界的刺激反應、細胞增殖、存活、黏附、遷移和分化等。,EGFR家族的組成和結構特點,,,EGFR信號轉導機制,,,(資料中字數太多，不適宜，建議尋找圖片，然后我們進行講解。),EGFR信號轉導機制,,,EGFR參與細胞信號跨膜轉導的核心

22、機制可以歸結為:EGFR受到配體(EGF)作用后,進行胞外域的(同/異)二聚化,進而通過跨膜區(qū)促進胞內域的二聚化;胞內域的二聚化趨動胞內域的激酶活性形成并進行自磷酸化,進而招募下游細胞信號分子完成細胞信號從膜外向膜內的轉導過程。,EGFR信號轉導機制,5、Her-2/neu,Her-2的結構、分子學特性與功能,,,HER2蛋白與表皮生長因子受體（EGFR）、HER-3、HER-4等同屬I類受體酪氨酸激酶（RTK）超家族，通常稱為HER家

23、族。它的結構與EGFR極其類似，其胞質區(qū)的260個氨基酸殘基（727-986）與EGFR的TK區(qū)有95％以上的同源性，故可以認為它是一個被激活的生長因子受體。HER-2蛋白與EGFR一樣均為跨膜的酪氨酸激酶受體，含有三個功能域：一個細胞外配體結合區(qū)（1~653殘基），一個親脂性的跨膜部分（654-675殘基）與一個具有酪氨酸激酶活性的胞質內區(qū)域（676~1255殘基）。,Her-2的結構、分子學特性與功能,,,HER-2可與RTK超家族

24、的其他成員之間形成異二聚體，當配體與細胞表面的異二聚體受體復合物包括HER2蛋白結合后，導致細胞內酪氨酸激酶的蛋白活化，發(fā)生酪氨酸自身的磷酸化，進而引發(fā)瀑布式的連鎖反應，信號轉導經細胞膜和細胞間質至細胞核，激活基因，促進有絲分裂。,Her-2的結構、分子學特性與功能,,,Her-2/neu原癌基因在正常情況下不會引起腫瘤，相反地，還具有重要生理功能，它與其他表皮生長因子受體一起，通過復雜的信號網絡調節(jié)細胞的生長和分化，在細胞進行生命活動

25、中必不可少。,Her-2在乳腺癌發(fā)生、診斷、預后中的作用,,,Her-2是腺體表皮因子受體之一，當乳腺癌發(fā)生時，它一定會過量表達。在預后中，同時Her-2陽性可作為變量分析中的一個獨立的預后指標。Her-2/neu受體過度表達時，乳腺癌病情進展迅速，化療緩解期短，內分泌治療效果差，而在治療時，Her-2陽性的乳腺癌患者對莫西芬不敏感，對其它的激素治療反應性降低。Her-2的過渡表達還可以導致激素受體的結構和功能出現某種缺陷。,6、單克隆

26、抗體,什么是單克隆抗體,,,動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細胞系，具有不同基因的B淋巴細胞合成不同的抗體。當機體受抗原刺激時，抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成效應B細胞（漿細胞）和記憶B細胞，大量的漿細胞克隆合成和分泌大量的抗體分子分布到血液、體液中。如果能選出一個制造一種專一抗體的漿細胞進行培養(yǎng)，就可得到由單細胞經分裂增殖而形成細胞群，即單克隆。單克隆細胞將合成針對一種抗原決定簇的抗體

27、，稱為單克隆抗體。,單克隆抗體制備方法,,,（一）動物的選擇與免疫　?。ǘ┘毎诤?　?。ㄈ┻x擇雜交瘤細胞及抗體檢測　?。ㄋ模╇s交瘤的克隆化　?。ㄎ澹╇s交瘤細胞的凍存與復蘇 （六）單克隆抗體的大量生產　?。ㄆ撸﹩慰寺】贵w的鑒定　　　?。ㄔ敿毞椒安襟E請見補充材料word文檔）,7、乳腺癌治療除常規(guī)外的生物治療方法,,,1 、表皮生長因子受體抑制劑 2 、胰島素樣生長因子的靶向治療 3 、基因治療

28、 4 、血管生成抑制治療 5 、COX一2抑制劑 6 、PKC—a抑制劑 7 、腫瘤疫苗 8 、細胞因子 9、 過繼性細胞免疫治療 （治療方法詳細介紹請參考補充材料word文檔）,8、乳腺癌的預防,乳腺癌的一級預防——病因預防：乳腺癌高危人群的確定 ⑴乳腺癌家族史，⑵良性乳腺疾病史，⑶初潮年齡小，⑷首次生育年齡晚，⑸絕經年齡晚。乳腺癌的二級預防——早期發(fā)現：乳房自查；高危人群普查，乳腺鉬靶X線攝影或B型超