pbl乳腺癌 ppt課件

1、乳腺癌,第三小組成員： 曾明潔、李青林、陳柏岑、 李梓杏、李競坤、曾小文,目的要求,,1、癌基因與抑癌基因的概念及作用機(jī)制,癌基因 概念,,,癌基因是一類會引起細(xì)胞癌變的基因。其實(shí)，原癌基因有其正常的生物學(xué)功能，主要是刺激細(xì)胞正常的生長，以滿足細(xì)胞更新的要求。只是當(dāng)原癌基因發(fā)生突變后，才會在沒有接收到生長信號的情況下仍然不斷地促使細(xì)胞生長或使細(xì)胞免于死亡，最后導(dǎo)致細(xì)胞癌變?？茖W(xué)界研究發(fā)現(xiàn)，血硒水平的高低與癌的發(fā)生息息相關(guān)。大量的

2、調(diào)查資料說明，一個地區(qū)食物和土壤中硒含量的高低與癌癥的發(fā)病率有直接關(guān)系。目前癌癥治療中使用硒輔助治療十分普遍。常用的補(bǔ)硒制劑有新稀寶、硒維康等。,癌基因 作用機(jī)制,,,一 、獲得啟動子與增強(qiáng)子。 當(dāng)逆轉(zhuǎn)錄病毒的長末端重復(fù)序列（含強(qiáng)啟動子和增強(qiáng)子）插入原癌基因附近或內(nèi)部時，啟動下游基因的轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致癌變。二 基因易位—染色體易位重排。 導(dǎo)致原來無活性的原癌基因移至強(qiáng)啟動子或增強(qiáng)子附近而活化。三 原癌基因擴(kuò)增。 原癌因擴(kuò)增

3、是原癌基因數(shù)量的增加或表達(dá)活性的增加，產(chǎn)生過量的表達(dá)蛋白也會導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生。四 點(diǎn)突變。 原癌基因在射線或化學(xué)致癌劑作用下，可能發(fā)生單個堿基的替換——點(diǎn)突變，從而改變了表達(dá)蛋白的氨基酸組成，造成蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的變異,抑癌基因 概念,,,也稱為抗癌基因。正常細(xì)胞中存在基因，在被激活情況下它們具有抑制細(xì)胞增殖作用，但在一定情況下被抑制或丟失后可減弱甚至消除抑癌作用的基因。正常情況下它們對細(xì)胞的發(fā)育、生長和分化的調(diào)節(jié)起重要作用,抑癌基

4、因 作用機(jī)制,,,其功能是抑制細(xì)胞周期，阻止細(xì)胞數(shù)目增多以及促使細(xì)胞死亡。通常是一對等位基因均告缺失或都因突變而失去活性時，細(xì)胞發(fā)生癌變，此時缺失或突變的基因一般就是抑癌基因。因此，抑癌基因反映了基因的功能丟失。抑癌基因原先有對細(xì)胞分裂周期或細(xì)胞生長設(shè)置限制的功能，當(dāng)抑癌基因的一對等位基因都缺失或都失去活性時，這種限制功能也就隨之丟失，于是出現(xiàn)了細(xì)胞癌變。抑癌基因與癌基因之間的區(qū)別在于癌基因只要有一個等位基因發(fā)生突變時就可引起癌變，而抑

5、癌基因只要有一個等位基因是野生型時，就可抑制癌變。目前已發(fā)現(xiàn)的抑癌基因有10多種。,2、BRAC1和BRAC2的特點(diǎn)和作用機(jī)理,BRAC1和BRAC2基因結(jié)構(gòu),BRAC1的特點(diǎn),,,單擊輸入內(nèi)容,BRCA1定位于人類17號染色體q21。以常染色體顯性遺傳方式遺傳，并有很高的外顯率。BRCA1長約100 kb，含24個外顯子。其基因產(chǎn)物是1863個氨基酸所構(gòu)成的磷酸化蛋白質(zhì)，相對分子量約200000。,,BRAC2的特點(diǎn),,,BRCA2

6、基因在1994年由Wooster等發(fā)現(xiàn)，定位于13號染色體q12。全基因組DNA長約70kb，其中編碼區(qū)含有10987bp，且富含AT（約64％），其基因序列與BRCA1無明顯關(guān)系。BRCA2由27個外顯子組成，其中第11個外顯子長約4932bp，mRNA長約10.2kb，編碼的BRCA2蛋白含3418個氨基酸。,BRAC2的作用機(jī)理,,,正常BRCA2蛋白位于細(xì)胞核內(nèi),參與DNA 的修復(fù)。在細(xì)胞周期的擴(kuò)增期的表達(dá)方式和BRCA1相似,

7、即在靜止期的細(xì)胞中檢測不到該基因的轉(zhuǎn)錄。在快速增殖的細(xì)胞中BRCA2 mRNA的表達(dá)明顯增多,且表現(xiàn)出細(xì)胞周期依賴性,在G0期和G1早期是低的,在G1/S期分界時達(dá)到高峰。這些結(jié)果表明BRCA2對于細(xì)胞生長的調(diào)節(jié)有著重要作用。許多研究表明：BRCA2蛋白與遺傳性乳腺癌、卵巢癌及范康尼氏貧血癥的發(fā)生具有密切關(guān)系，猜測其與雙鏈DNA損傷修復(fù)有關(guān)，但具體作用模式與機(jī)制仍不清楚。,3、細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo),細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo),,,在多細(xì)胞生物中，細(xì)胞與細(xì)胞之

8、間的相互溝通除直接接觸外，更主要的是通過內(nèi)分泌、旁分泌和自分泌一些信息分子來進(jìn)行協(xié)調(diào)。細(xì)胞通過位于胞膜或胞內(nèi)的受體感受胞外信息分子的刺激，經(jīng)復(fù)雜的細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的轉(zhuǎn)換而影響其生物學(xué)功能，這一過程稱為細(xì)細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)(cellular signal transduction)，這是細(xì)胞對外界刺激做出應(yīng)答反應(yīng)的基本生物學(xué)方式。,細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的基本步驟,信息物質(zhì),,(一)細(xì)胞間信息物質(zhì)：,（二）細(xì)胞內(nèi)信息物質(zhì):,凡由細(xì)胞分泌的調(diào)節(jié)細(xì)胞生命

9、活動的化學(xué)物質(zhì)。,主要包括：蛋白質(zhì)、肽類、氨基酸及其衍生物、類固醇激素、氣體分子NO、CO等。,在細(xì)胞內(nèi)傳遞細(xì)胞調(diào)控信號的化學(xué)物質(zhì)。,,主要包括：無機(jī)離子、脂類衍生物、糖類衍生物、核苷酸等。,,細(xì)胞信號的種類,（1）cAMP-蛋白激酶A途徑（2）Ca2+ -依賴性蛋白激酶途徑 （3）cGMP蛋白激酶途徑（4）酪氨酸蛋白激酶途徑（5）Notch信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑（6）核因子κB途徑（7）TGF-β途徑（8）胞內(nèi)受體介導(dǎo)的信息傳遞

10、,,信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,補(bǔ)充：信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑,受體的分類（位置）,（一）膜受體存在于細(xì)胞質(zhì)膜上的受體，稱為膜受體。絕大多數(shù)是糖蛋白，少數(shù)是糖脂配體（生長因子、細(xì)胞因子、水溶性激素分子、黏附分子等）根據(jù)其結(jié)構(gòu)和轉(zhuǎn)換信號的方式分為三類1. 環(huán)狀受體 2. 七次跨膜α螺旋受體 3. 單次跨膜螺旋受體（二）細(xì)胞內(nèi)受體根據(jù)在細(xì)胞中的分布情況，胞內(nèi)受體又可分為胞質(zhì)受體和核受體 ，多為DNA結(jié)合蛋白。多是反式作用因子，當(dāng)與相應(yīng)的配體結(jié)合后，可

11、與DNA的順式作用元件結(jié)合，調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄。配體（類固醇激素、甲狀腺素、維甲酸等）,,,1、環(huán)狀受體(配體閘門通道),功能：主要在神經(jīng)沖動傳遞中起作用。神經(jīng)遞質(zhì)與該類受體結(jié)合,使離子通道打開或關(guān)閉。在實(shí)現(xiàn)離子的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)的同時實(shí)現(xiàn)了化學(xué)信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)。,又稱配體依賴型離子通道（ligand-gated ion channel）是一類自身為離子通道的受體，主要存在于神經(jīng)、肌肉等可興奮細(xì)胞，信號分子為神經(jīng)遞質(zhì)：如N-乙酰膽堿受體等。這類受體常由5

12、個亞單位組成,G蛋白偶聯(lián)受體(G-protein coupled receptors, GPCR ）作為人類基因組編碼的最大類別膜蛋白超家族，有800多個家族成員，與人體生理代謝幾乎各個方面都密切關(guān)聯(lián)。它們的構(gòu)象高度靈活，調(diào)控非常復(fù)雜，天然豐度很低。配體：腎上腺素、異高血糖素等激素、嗅覺、視覺、味覺等,2、七次跨膜受體（seven-helix receptor）,特點(diǎn)：七次跨膜受體與相應(yīng)的配體結(jié)合后，觸發(fā)受體蛋白的構(gòu)象改變，后者再進(jìn)

13、一步調(diào)節(jié)G蛋白的活性，激活A(yù)C(或磷脂酶C)，使細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生第二信使。故這類受體也稱為G蛋白耦聯(lián)受體（G protein-coupled receptor，GPCR）。,激素與受體結(jié)合,細(xì)胞膜上的酶活化（AC 等）,胞質(zhì)內(nèi)第二信使?jié)舛仍黾?,,,,促進(jìn)蛋白激酶活性，產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)（細(xì)胞代謝、基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控）,結(jié)構(gòu):含1條肽鏈的糖蛋白,N端在細(xì)胞膜外側(cè),C端在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),中段是7個跨膜螺旋結(jié)構(gòu)，受體的第3個環(huán)可與G蛋白耦聯(lián) 。,信息傳遞步驟

14、：,受體蛋白的構(gòu)象改變調(diào)節(jié)G蛋白的活性,,一條肽鏈糖蛋白,3、單次跨膜螺旋受體,分類（受體結(jié)構(gòu)的差別）：（1）酪氨酸蛋白激酶受體（2）非催化型單個跨膜受體/細(xì)胞因子受體（3）蛋白絲氨酸和蘇氨酸激酶受體 （4）鳥苷酸環(huán)化酶活性的受體,,結(jié)構(gòu)：是由1條多肽鏈構(gòu)成的跨膜糖蛋白，N端位于質(zhì)膜外，是配體的結(jié)合部位，C端位于胞質(zhì)內(nèi)，本身具有激酶功能區(qū)域可與蛋白激酶偶聯(lián)而表現(xiàn)出酶活性。,（1）酪氨酸蛋白激酶受體（TPK receptor ）

15、,結(jié)構(gòu)：是由1條多肽鏈構(gòu)成的跨膜糖蛋白N端位于質(zhì)膜外，是配體的結(jié)合部位，跨膜區(qū)域近膜結(jié)構(gòu)域酪氨酸蛋白激酶結(jié)構(gòu)域C端位于胞質(zhì)內(nèi),,使底物磷酸化，與細(xì)胞的增殖、分化、癌變有關(guān)。,配體受體結(jié)合,受體蛋白質(zhì)構(gòu)象改變,（存在自身磷酸化位點(diǎn)，調(diào)節(jié)酪氨酸激酶活性）,,,配體:胰島素(insulin)表皮生長因子(EGF)血小板衍生生長因子(PDGF)神經(jīng)生長因子(NGF)成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)血管內(nèi)皮生長因子(VEGF),

16、,功能：,（二）細(xì)胞核受體結(jié)構(gòu)特征,胞內(nèi)受體通常為由400～1000個氨基酸組成的單體蛋白，包括四個區(qū)域：①高度可變區(qū)：位于N末端的氨基酸序列高度可變，長度不一，具有轉(zhuǎn)錄激活功能。②DNA結(jié)合區(qū)：其DNA結(jié)合區(qū)域由66～68個氨基酸殘基組成，富含半胱氨酸殘基，具兩個鋅指結(jié)構(gòu)，由此可與DNA結(jié)合。③鉸鏈區(qū)：為一短序列，可能有與轉(zhuǎn)錄因子相互作用和觸發(fā)受體向核內(nèi)移動的功能。④激素結(jié)合區(qū)：位于C末端，由200～250個氨基酸殘基組成，是

17、配體結(jié)合的區(qū)域，這一區(qū)域?qū)τ谑荏w二聚化及轉(zhuǎn)錄激活也有重要作用。,圖—胞內(nèi)受體,4、EGFR家族,EGFR家族成員,,,1．EGFR家族，又稱為EGFR酪氨酸激酶家族，由4個不同的受體酪氨酸激酶組成，分別為：a)EGFR（HER-1/ErbB-1）：廣泛分布于除血管組織外的上皮細(xì)胞膜上。b)ErbB-2（HER2/neu）：在正常人體腔上皮、腺上皮及胚胎中均有普遍的微弱表達(dá)。c)ErbB-3（HER3）：在除造血系統(tǒng)外的多數(shù)部位有表

18、達(dá)。d)ErbB-4（HER4）：在除腎小球及周圍神經(jīng)外的所有成年組織中均可檢測到其表達(dá)。,EGFR家族的組成和結(jié)構(gòu)特點(diǎn),,,EGFR定位于細(xì)胞膜上，由胞外的配體結(jié)合區(qū)、疏水跨膜結(jié)構(gòu)域和胞內(nèi)酪氨酸激酶區(qū)三部分構(gòu)成。a)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)包含1個酪氨酸激酶域和多個自身磷酸化位點(diǎn)。b)膜外區(qū)域由配體結(jié)合位點(diǎn)和2個富含半胱氨酸的區(qū)域夠成，能結(jié)合具有激動功能的多種配體。主要配體有EGF和轉(zhuǎn)換生長因子（transforminggrowthfactor

19、-α，TGF-α）。,EGFR家族的組成和結(jié)構(gòu)特點(diǎn),,,EGF和TGF-α與EGFR結(jié)合后，EGFR形成二聚體，結(jié)合1個ATP分子，激活EGFR自身酪氨酸激酶活性，使胞內(nèi)自身磷酸化位點(diǎn)，從而激活下游的Ras-Raf-MAPK（mitogen-activated-protein-kinase,MAPK）級聯(lián)系統(tǒng)和磷酸肌醇激酶（phosphoinositolkinase）系統(tǒng)，成為下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的親和位點(diǎn)，與多種參與有絲分裂的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子產(chǎn)生

20、高親和，通過這些信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)將有絲分裂信號從細(xì)胞外傳遞到細(xì)胞內(nèi)，從而有效調(diào)節(jié)細(xì)胞3對外界的刺激反應(yīng)、細(xì)胞增殖、存活、黏附、遷移和分化等。,EGFR家族的組成和結(jié)構(gòu)特點(diǎn),,,EGF和TGF-α與EGFR結(jié)合后，EGFR形成二聚體，結(jié)合1個ATP分子，激活EGFR自身酪氨酸激酶活性，使胞內(nèi)自身磷酸化位點(diǎn)，從而激活下游的Ras-Raf-MAPK（mitogen-activated-protein-kinase,MAPK）級聯(lián)系統(tǒng)和磷酸肌醇激

21、酶（phosphoinositolkinase）系統(tǒng)，成為下游信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的親和位點(diǎn)，與多種參與有絲分裂的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子產(chǎn)生高親和，通過這些信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)將有絲分裂信號從細(xì)胞外傳遞到細(xì)胞內(nèi)，從而有效調(diào)節(jié)細(xì)胞3對外界的刺激反應(yīng)、細(xì)胞增殖、存活、黏附、遷移和分化等。,EGFR家族的組成和結(jié)構(gòu)特點(diǎn),,,EGFR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制,,,(資料中字?jǐn)?shù)太多，不適宜，建議尋找圖片，然后我們進(jìn)行講解。),EGFR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制,,,EGFR參與細(xì)胞信號跨膜轉(zhuǎn)導(dǎo)的核心

22、機(jī)制可以歸結(jié)為:EGFR受到配體(EGF)作用后,進(jìn)行胞外域的(同/異)二聚化,進(jìn)而通過跨膜區(qū)促進(jìn)胞內(nèi)域的二聚化;胞內(nèi)域的二聚化趨動胞內(nèi)域的激酶活性形成并進(jìn)行自磷酸化,進(jìn)而招募下游細(xì)胞信號分子完成細(xì)胞信號從膜外向膜內(nèi)的轉(zhuǎn)導(dǎo)過程。,EGFR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制,5、Her-2/neu,Her-2的結(jié)構(gòu)、分子學(xué)特性與功能,,,HER2蛋白與表皮生長因子受體（EGFR）、HER-3、HER-4等同屬I類受體酪氨酸激酶（RTK）超家族，通常稱為HER家

23、族。它的結(jié)構(gòu)與EGFR極其類似，其胞質(zhì)區(qū)的260個氨基酸殘基（727-986）與EGFR的TK區(qū)有95％以上的同源性，故可以認(rèn)為它是一個被激活的生長因子受體。HER-2蛋白與EGFR一樣均為跨膜的酪氨酸激酶受體，含有三個功能域：一個細(xì)胞外配體結(jié)合區(qū)（1~653殘基），一個親脂性的跨膜部分（654-675殘基）與一個具有酪氨酸激酶活性的胞質(zhì)內(nèi)區(qū)域（676~1255殘基）。,Her-2的結(jié)構(gòu)、分子學(xué)特性與功能,,,HER-2可與RTK超家族

24、的其他成員之間形成異二聚體，當(dāng)配體與細(xì)胞表面的異二聚體受體復(fù)合物包括HER2蛋白結(jié)合后，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)酪氨酸激酶的蛋白活化，發(fā)生酪氨酸自身的磷酸化，進(jìn)而引發(fā)瀑布式的連鎖反應(yīng)，信號轉(zhuǎn)導(dǎo)經(jīng)細(xì)胞膜和細(xì)胞間質(zhì)至細(xì)胞核，激活基因，促進(jìn)有絲分裂。,Her-2的結(jié)構(gòu)、分子學(xué)特性與功能,,,Her-2/neu原癌基因在正常情況下不會引起腫瘤，相反地，還具有重要生理功能，它與其他表皮生長因子受體一起，通過復(fù)雜的信號網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長和分化，在細(xì)胞進(jìn)行生命活動

25、中必不可少。,Her-2在乳腺癌發(fā)生、診斷、預(yù)后中的作用,,,Her-2是腺體表皮因子受體之一，當(dāng)乳腺癌發(fā)生時，它一定會過量表達(dá)。在預(yù)后中，同時Her-2陽性可作為變量分析中的一個獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)。Her-2/neu受體過度表達(dá)時，乳腺癌病情進(jìn)展迅速，化療緩解期短，內(nèi)分泌治療效果差，而在治療時，Her-2陽性的乳腺癌患者對莫西芬不敏感，對其它的激素治療反應(yīng)性降低。Her-2的過渡表達(dá)還可以導(dǎo)致激素受體的結(jié)構(gòu)和功能出現(xiàn)某種缺陷。,6、單克隆

26、抗體,什么是單克隆抗體,,,動物脾臟有上百萬種不同的B淋巴細(xì)胞系，具有不同基因的B淋巴細(xì)胞合成不同的抗體。當(dāng)機(jī)體受抗原刺激時，抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細(xì)胞。被激活的B細(xì)胞分裂增殖形成效應(yīng)B細(xì)胞（漿細(xì)胞）和記憶B細(xì)胞，大量的漿細(xì)胞克隆合成和分泌大量的抗體分子分布到血液、體液中。如果能選出一個制造一種專一抗體的漿細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，就可得到由單細(xì)胞經(jīng)分裂增殖而形成細(xì)胞群，即單克隆。單克隆細(xì)胞將合成針對一種抗原決定簇的抗體

27、，稱為單克隆抗體。,單克隆抗體制備方法,,,（一）動物的選擇與免疫　?。ǘ┘?xì)胞融合 　　（三）選擇雜交瘤細(xì)胞及抗體檢測　?。ㄋ模╇s交瘤的克隆化　　（五）雜交瘤細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇 （六）單克隆抗體的大量生產(chǎn)　?。ㄆ撸﹩慰寺】贵w的鑒定　　　?。ㄔ敿?xì)方法及步驟請見補(bǔ)充材料word文檔）,7、乳腺癌治療除常規(guī)外的生物治療方法,,,1 、表皮生長因子受體抑制劑 2 、胰島素樣生長因子的靶向治療 3 、基因治療

28、 4 、血管生成抑制治療 5 、COX一2抑制劑 6 、PKC—a抑制劑 7 、腫瘤疫苗 8 、細(xì)胞因子 9、 過繼性細(xì)胞免疫治療 （治療方法詳細(xì)介紹請參考補(bǔ)充材料word文檔）,8、乳腺癌的預(yù)防,乳腺癌的一級預(yù)防——病因預(yù)防：乳腺癌高危人群的確定 ⑴乳腺癌家族史，⑵良性乳腺疾病史，⑶初潮年齡小，⑷首次生育年齡晚，⑸絕經(jīng)年齡晚。乳腺癌的二級預(yù)防——早期發(fā)現(xiàn)：乳房自查；高危人群普查，乳腺鉬靶X線攝影或B型超