降解秸稈微生物菌種的篩選及高效菌群的構建.pdf

1、為了獲得高效降解纖維素的混合菌群，以解決秸稈類固廢污染和秸稈資源有效利用的問題，本試驗進行了纖維素降解菌的篩選及其降解效果研究。
　　高效纖維素降解菌群的篩選：采用剛果紅纖維素瓊脂平板培養(yǎng)基，從土壤樣品中初步篩選纖維素降解菌，對降解作用較好的菌株，再以內(nèi)切酶(CMC)、纖維素全酶(FPA)、外切酶(C1)和β-葡萄糖苷酶(β-Gase)4種酶活性指標進行復篩。對復篩獲得的高效菌株進行混合培養(yǎng)，分別測定比較組合菌群的CMC、FPA、

2、C1和β-Gase4種酶活性，篩選出高效纖維素降解菌群。
　　產(chǎn)酶影響因素研究：將構建菌群ye-9/er-72/se-93接種于液體產(chǎn)酶培養(yǎng)基中，連續(xù)培養(yǎng)7 d，測定不同時間、溫度、pH、碳源和氮源條件下其酶活性。
　　菌群的纖維素降解能力測定：采用失重法和掃描電鏡分析對菌群降解玉米秸稈的能力進行試驗研究。
　　菌種鑒定：對ye-9，er-72和se-933株菌進行形態(tài)鑒定以及分子鑒定。
　　通過上述實驗得到以下

3、結果：
　　高效纖維素降解菌群的篩選：篩選獲得了y3、yi-71、ye-9、er-72和se-93等5株活性較高的纖維素降解菌。對5株纖維素降解菌進行組合培養(yǎng)，得到1個最好組合ye-9/er-72/se-93，其CMC、FPA、C1和β-Gase4種酶活分別為3.18，1.67，1.08和1.12U/mL，均比單菌株時有一定程度提高。
　　產(chǎn)酶影響因素研究：結果顯示，該菌群最適產(chǎn)酶時間是第4 d，最適產(chǎn)酶溫度是40℃，最適產(chǎn)

4、酶pH值是7.5，最適產(chǎn)酶碳源為玉米秸稈，最適產(chǎn)酶氮源為NaNO3。
　　高效降解菌群的纖維素降解能力測定：到第8 d培養(yǎng)結束時纖維素降低了24.07％，半纖維素降低了28.31％，木質(zhì)素降低了18.39％。通過比較電鏡掃描圖片可以看出菌群ve-9/er-72/se-93對玉米秸稈的降解能力強于單菌株。
　　菌種鑒定：ye-9為鏈霉菌屬的鯉鏈霉菌(Streptomyces carpaticus)，er-72為灰略紅鏈霉菌(S