一株產(chǎn)靈菌紅素的沙雷氏菌誘變育種和發(fā)酵條件優(yōu)化的研究.pdf

1、本文以本實(shí)驗(yàn)室保存的一株產(chǎn)靈菌紅素的粘質(zhì)沙雷氏菌RZ21 為出發(fā)菌株，對(duì)其菌株復(fù)壯、原生質(zhì)體誘變、發(fā)酵條件優(yōu)化、色素提取和生物防治等方面作了初步的研究。
　　 為提高RZ21 產(chǎn)靈菌紅素的能力，對(duì)RZ21菌進(jìn)行了原生質(zhì)體的紫外誘變育種。通過(guò)紫外誘變?cè)|(zhì)體、鏈霉素抗性平板初篩、搖瓶發(fā)酵復(fù)篩得到一株靈菌紅素高產(chǎn)株RZ21-3，其靈菌紅素產(chǎn)量達(dá)到了0.813g/L，比野生型的RZ21 提高了24.9％，而且突變株的靈菌紅素生產(chǎn)能力遺

2、傳穩(wěn)定性較好。
　　 為進(jìn)一步提高RZ21-3 產(chǎn)靈菌紅素能力，對(duì)RZ21-3 培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件進(jìn)行了優(yōu)化。通過(guò)單因子試驗(yàn)和正交試驗(yàn)得出RZ21-3 發(fā)酵產(chǎn)靈菌紅素的最佳培養(yǎng)基配比為：黃豆粉0.5％、酪素1％、蠶蛹粉1％、K2HPO4 0.2％、NaCl 0.5％。最佳培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度28 ℃、裝液量250mL 三角瓶30mL、轉(zhuǎn)速150rpm、初始pH7.5、接種量2％。在上述條件下，靈菌紅素產(chǎn)量達(dá)2.64g/L。

3、　　 通過(guò)提取、柱層析及TLC 分離純化RZ21-3 產(chǎn)生的色素，并通過(guò)紫外全波長(zhǎng)掃描、質(zhì)譜、核磁對(duì)色素進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，確定該紅色素為靈菌紅素。
　　 粘質(zhì)沙雷氏菌是昆蟲(chóng)的一種病原菌，能感染許多昆蟲(chóng)的成蟲(chóng)和幼蟲(chóng)。家蠶（Bombyx mori. L）是一種鱗翅目昆蟲(chóng)的幼蟲(chóng)，通過(guò)RZ21菌對(duì)家蠶的毒力試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)該菌對(duì)家蠶表現(xiàn)出明顯的毒殺效果，口服感染48h 后毒力回歸方程為y=1.5271x+1.8908，致死中濃度為1.09×10