殼聚糖對(duì)肉雞免疫功能的影響及其分子機(jī)理研究.pdf

1、本論文共分4個(gè)試驗(yàn)研究了殼聚糖對(duì)肉雞免疫功能的影響及其機(jī)制。試驗(yàn)1～試驗(yàn)3利用體內(nèi)法，采用單因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將1日齡健康艾維茵肉仔雞（公母各半）240只，隨機(jī)分為6個(gè)日糧處理組，每個(gè)處理組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)組8只雞，試驗(yàn)期42天。以玉米和豆粕為主要原料配制試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，其他5種試驗(yàn)日糧分別是在基礎(chǔ)日糧中添加50、200、500、1000和2000mg/kg的殼聚糖配制而成。試驗(yàn)1研究了殼聚糖對(duì)肉雞體液免疫功能和

2、細(xì)胞免疫功能的影響，進(jìn)一步驗(yàn)證了殼聚糖對(duì)肉雞免疫功能的促進(jìn)作用。試驗(yàn)2主要從內(nèi)分泌角度探討了殼聚糖對(duì)肉雞免疫功能的影響機(jī)制。試驗(yàn)3主要通過(guò)研究殼聚糖對(duì)肉雞小腸組織中iNOSmRNA和cPLA2mRNA相對(duì)表達(dá)的影響，探討了殼聚糖對(duì)肉雞免疫功能影響的分子機(jī)理。試驗(yàn)4利用體外細(xì)胞培養(yǎng)法，研究了不同濃度殼聚糖（0，40，80，160和320μg/ml）對(duì)肉雞腹腔巨噬細(xì)胞分泌功能及iNOSmRNA和cPLA2mRNA相對(duì)表達(dá)的影響，從細(xì)胞水平和

3、分子水平進(jìn)一步探討了殼聚糖對(duì)肉雞免疫功能的影響機(jī)制。 在本研究的試驗(yàn)條件下初步得出以下結(jié)果： ①日糧中添加殼聚糖可提高肉雞的體液免疫功能與細(xì)胞免疫功能。殼聚糖添加量為500～1000mg/kg時(shí)，新城疫抗體滴度、T淋巴細(xì)胞亞群含量、血清免疫球蛋白濃度均呈不同程度增加，肉雞免疫功能較強(qiáng)；殼聚糖添加量為2000mg/kg時(shí)，肉雞免疫功能呈降低趨勢(shì)。 ②日糧殼聚糖對(duì)肉雞血清免疫細(xì)胞因子IL—I、IL—2和相關(guān)激素的影響

4、呈顯著二次曲線劑量依賴關(guān)系（P<0.05）。殼聚糖的添加水平為500～1000mg/kg時(shí)，血清IL-1、IL—2及TNF—a濃度較高，ACTH及COR濃度較低。當(dāng)日糧殼聚糖添加量提高到2000mg/kg時(shí)，ACTH及COR濃度升高，IL-1、IL—2、TNF—α濃度均呈不同程度的降低趨勢(shì)。提示殼聚糖對(duì)肉雞免疫功能的影響與免疫細(xì)胞因子和相關(guān)激素的水平發(fā)生改變有關(guān)。 ③利用體內(nèi)法從分子水平研究了日糧殼聚糖對(duì)肉雞免疫功能的影響機(jī)制。

5、研究表明：日糧殼聚糖可提高血清NO含量及iNOS活性，增強(qiáng)小腸iNOSmRNA表達(dá)，血清NO含量、iNOS活性與小腸iNOSmRNA表達(dá)均隨殼聚糖添加量的增加而增加，并呈顯著的二次劑量依賴關(guān)系（P<0.05）；其中，以添加500～1000mg/kg時(shí)較高，添加2000mg/kg時(shí)則有降低趨勢(shì)。日糧中添加殼聚糖對(duì)肉雞血清PLA2、AA和PGE2濃度的增加及小腸cPLA2mRNA表達(dá)均有顯著的促進(jìn)效果。隨殼聚糖添加量的增加，上述各項(xiàng)指標(biāo)均呈

6、顯著的二次曲線增加（P<0.05）：其中以添加500～1000mg/kg時(shí)效果較好，但添加2000mg/kg時(shí)促進(jìn)效果呈降低趨勢(shì)。 ④體外法研究結(jié)果表明：殼聚糖可顯著增強(qiáng)肉雞腹腔巨噬細(xì)胞iNOSmRNA表達(dá)（P<0.05），對(duì)NO及iNOS的分泌均有一定促進(jìn)效果；殼聚糖可顯著促進(jìn)腹腔巨噬細(xì)胞cPLA2mRNA表達(dá)與cPLA2活性（P<0.05），對(duì)PLA2、AA、PGE2及LTB4的分泌均有一定促進(jìn)效果。提示殼聚糖可促進(jìn)肉雞巨噬