大豆組織培養(yǎng)體系的優(yōu)化及EPSPS遺傳轉(zhuǎn)化的研究.pdf

1、通過基因工程的方法將抗除草劑基因轉(zhuǎn)入到目前生產(chǎn)上正在應(yīng)用的大豆品種中,可以為培育抗除草劑品種提供育種材料。成功的遺傳轉(zhuǎn)化依賴于良好的再生系統(tǒng),目前,大豆的組織培養(yǎng)仍存在很多問題,本實驗旨在完善大豆組織培養(yǎng)及轉(zhuǎn)化體系,從而緩解大豆再生頻率及遺傳轉(zhuǎn)化率低的難題,同時提高再生苗移栽的成活率。使用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大豆子葉節(jié)轉(zhuǎn)化方法,對受體大豆品種黑農(nóng)37、北京小粒豆進行了遺傳轉(zhuǎn)化的研究,建立了較為完善的大豆遺傳轉(zhuǎn)化體系。實驗中利用子葉節(jié)方法轉(zhuǎn)化北京

2、小粒豆,已得到抗性植株225棵,種子38粒。
　　 研究表明大豆種子利用氯氣滅菌法滅菌,利用300mL的密封杯,每次20mL次氯酸鈉加2mL濃鹽酸,滅菌時間5h效果良好,既能保證滅菌效果,又不明顯降低大豆發(fā)芽率。向發(fā)芽培養(yǎng)基中添加大約2mg／L的BAP可以提高遺傳轉(zhuǎn)化率。實驗還得出最適宜的叢生芽誘導(dǎo)延遲培養(yǎng)天數(shù)為7天,可緩解叢生芽分化過多而很難伸長的問題。
　　 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大豆子葉節(jié)法轉(zhuǎn)基因,當采用草甘膦作為轉(zhuǎn)化篩選劑