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文檔簡(jiǎn)介
1、本文以凡納濱對(duì)蝦為研究對(duì)象,設(shè)置了五個(gè)濃度的銅添加量,分別為0、15mg/kg、30mg/kg、45mg/kg和60mg/kg(實(shí)際銅含量為11.12 mg/kg、19.10 mg/kg、30.27 mg/kg、49.18 mg/kg、63.48 mg/kg)。每組三個(gè)平行,養(yǎng)殖8周后,利用生物化學(xué)以及realtime-PCR技術(shù)測(cè)定凡納濱對(duì)蝦血細(xì)胞和肝胰腺中的酚氧化酶原激活系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)的酶活及相關(guān)基因的mRNA表達(dá)量。
2、 結(jié)果表明,當(dāng)銅添加量為30mg/kg時(shí),凡納濱對(duì)蝦的特定生長(zhǎng)率、血細(xì)胞總數(shù)和吞噬活力均在此組達(dá)到最大,說明當(dāng)餌料中銅添加量為30mg/kg時(shí)對(duì)蝦生長(zhǎng)最快。而抗超氧陰離子的活性、GST活性在添加45mg/kg銅時(shí)最高。PO和SOD活性分別在添加30mg/kg和45mg/kg銅時(shí)最高,兩組間沒有顯著性差異。在銅添加量為15-45mg/kg范圍內(nèi),CAT活性都能維持在一個(gè)較高的水平。
本實(shí)驗(yàn)還研究了餌料中不同銅濃度對(duì)凡納濱對(duì)
3、蝦血細(xì)胞中酚氧化酶原系統(tǒng)重要基因(proPO-1、proPO-2、Sp、Pe),以及血細(xì)胞和肝胰腺中MnSOD、GST、GPX、CAT、血藍(lán)蛋白、Ferritin等重要抗氧化基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明,在餌料中添加45 mg/kg銅時(shí),凡納濱對(duì)蝦血細(xì)胞中的proPO-1和proPO-2基因表達(dá)量最高;PE和絲氨酸蛋白酶的mRNA表達(dá)量也是各組中最高的。血細(xì)胞和肝胰腺中的MnSOD基因表達(dá)量均在添加45mg/kg銅時(shí)達(dá)到最高。血藍(lán)蛋白與CA
4、T也在添加45mg/kg時(shí)有最高的基因表達(dá)水平。同時(shí)鐵蛋白在血細(xì)胞中的mRNA表達(dá)也是各組中最高的,但是在肝胰腺中的表達(dá)量確是在添加60mg/kg銅時(shí)最高。
GST基因表達(dá)量與其他基因的的變化趨勢(shì)相反,在添加30mg/kg 銅時(shí)最低。GPx在添加30-45mg/kg時(shí)表達(dá)量最低。說明基礎(chǔ)餌料中添加45 mg/kg銅是是凡納濱對(duì)蝦處于最活躍的免疫狀態(tài)。
通過本實(shí)驗(yàn)得知,不同的基因在機(jī)體內(nèi)對(duì)銅的敏感性有所不同,但
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