南瓜未受精胚珠離體培養(yǎng)體系的優(yōu)化.pdf

1、南瓜又名倭瓜,藥用保健功效以及觀賞價值高,具有“世界性蔬菜”的美稱。我國南瓜的優(yōu)良品種類型少,更新?lián)Q代非常慢,相關的育種理論基礎嚴重滯后。為了加快南瓜育種進程,探討南瓜未受精胚珠誘導的最佳培養(yǎng)條件,本試驗以‘試驗南瓜1號’為材料,以MS+蔗糖(30.00g·L-1)+瓊脂(6.00g.L-1)+2,4-D(1.00mg·L-1)斗NAA(0.25mg·L-1)+6-BA(0.50mg·L-1)為基本培養(yǎng)基,在此培養(yǎng)基的基礎上,研究KT預

2、處理和AgNO3刺激對未受精胚珠誘導的影響。同時運用石蠟切片技術觀察四個重要時期胚囊的發(fā)育狀態(tài)并以改良苯酚品紅壓片法觀察根尖染色體,以期為南瓜單倍體的培養(yǎng)和鑒定提供一定的理論支撐。本試驗的研究結果如下:
　　 1.南瓜未受精胚珠胚狀體的誘導以組合MS+蔗糖(30.00g·L-1)+瓊脂(6.00g·L-1)+2,4-D(1.00mg·L-1)+NAA(0.25mg·L-1)+6-BA(0.50mg·L-1)為宜,胚狀體誘導率為3

3、.3％。而此后的分化再生培養(yǎng)基則以MS+蔗糖(30.00g·L-1)+瓊脂(6.00g·L-1)和MS+蔗糖(30.00g·L-1)+瓊脂(6.00g·L-1)+活性炭(1.00g·L-1)為佳。
　　 2.試驗發(fā)現(xiàn)不定芽也能發(fā)育成正常植株,但比率很低,只有0.3％～6.7％,而胚狀體發(fā)育成正常植株的比率高達70％以上。
　　 3.AgNO3刺激對南瓜未受精胚珠不定芽的分化具有促進作用,最佳濃度為16mg·L-1。KT預

4、處理對南瓜未受精胚珠的不定芽的發(fā)生具有抑制作用,這種抑制作用在開花當天的未受精胚珠上最為明顯,使其出芽率從50％降到了3.3％,對其他兩個接種時期未受精胚珠的抑制作用稍減。另外KT預處理和AgNO3刺激均對未受精胚珠胚狀體和小苗的誘導具有抑制作用。
　　 4.開花前三天的子房處于單核胚囊時期；開花前兩天的子房處于雙核胚囊時期；開花前一天的子房處于四核胚囊時期；開花當天的子房處于七細胞八核的成熟胚囊期,其胚囊為蓼型胚囊。處于成熟胚