大菱鲆性腺分化組織學和早期性別快速鑒定技術的研究.pdf

1、大菱鲆是當前世界上養(yǎng)殖產量最高、經濟規(guī)模最大的海水魚類之一,在我國是重要的海水養(yǎng)殖魚類。本論文以工廠化養(yǎng)殖的大菱鲆魚苗為研究對象,運用組織學觀察手段,對大菱鲆原始性腺的發(fā)育和精巢卵巢性分化的過程進行了深入研究和分析,同時探索建立了大菱鲆早期性別快速檢測鑒定技術,所得結果結論如下:
　　 1.大菱鲆早期原始性腺發(fā)育的組織學觀察
　　 組織學連續(xù)切片,H.E.染色,初孵仔魚至40日齡,全長2.5mm-32.2mm,在顯微鏡下

2、觀察:大菱鲆的原始生殖細胞(primordial germ cell,PGC)在形成后,經過遷移,轉移到位于腹腔壁上的生殖嵴中,10日齡仔魚,全長6.14mm,觀察到PGC已經遷入到位于腎管下方和腸管之間體腔膜上的生殖嵴中,此時觀察到的PGC胞徑約為5.1μm～6.5μm,核徑約為2.4μm～3.3μm;15日齡時,全長8.41mm,觀察到原始性腺一端固定在腎臟下方的體腔膜上,其中有多個PGC的存在;20日齡,全長14.55mm,仔魚已

3、經偏轉變態(tài),原始性腺兩端都固定在體腔膜上;25日齡,17.76mm,原始性腺開始慢慢遠離腎臟,逐步向體腔下緣移動,從靠近腎臟的體腔膜上游離出來,另一端固定在體腔下緣的體膜上;30日齡,全長24.21mm,原始性腺已經轉移到腹腔下緣,與腎臟之間距離繼續(xù)擴大;40日齡,平均全長32.2mm,此時原始性腺已經完全轉移到體腔底部,遠離腎臟,一端固定于腹腔底部的腹腔膜上,另一端游離在腹腔中發(fā)育。性腺中未發(fā)現明顯的性分化特征。
　　 2.大

4、菱鲆卵巢分化的組織學觀察
　　 大菱鲆經過原始性腺時期后進入性分化階段。卵原細胞經有絲分裂增殖形成卵原細胞簇是卵巢分化的細胞學證據,卵巢腔的形成則是大菱鲆卵巢分化的解剖學證據。大菱鲆幼魚在全長35.2mm時,性腺中開始出現成簇的PGCs群,同時靠近腹腔壁一側與腹腔壁體細胞融合圍成一個空腔,這是向著卵巢分化的最初標志;到全長40.3mm時,卵巢中形成了卵巢腔;隨著性腺的不斷發(fā)育,卵巢腔不斷擴大,卵巢形成,至全長69.3mm時,大菱

5、鲆卵巢開始形成向尾部肌肉延伸的突起:全長113.4mm時,卵巢中觀察到Ⅰ時相卵母細胞,卵巢分化完成。
　　 3.大菱鲆精巢分化的組織學觀察
　　 大菱鲆精巢分化要晚于卵巢分化,與其他魚類性別分化規(guī)律一致。從本實驗研究結果看,大菱鲆幼魚在全長47.6mm時,出現了包裹數個精原細胞的囊狀結構-精小囊;在全長55.2mm時,精小囊清晰可見:全長64.2mm時,精原細胞小型化明顯,達到增殖末期,開始向精母細胞轉化,在之后的發(fā)育過

6、程中沒有發(fā)現明顯的結構特征變化直至分化完成。
　　 4.大菱鲆早期性別快速鑒定技術
　　 對于全長9cm～15cm,體重10g～90g之間,肉眼無法區(qū)分雌雄的大菱鲆幼魚取其性腺,進行現場檢測鑒定,采用活體壓片,醋酸洋紅染色,鏡檢染色結果發(fā)現:壓片染色結果差異性非常明顯,特別是卵巢,可觀察到大量的卵原細胞,卵原細胞體積大,十分清晰,特征明顯,精巢沒有明顯的結構特征,顯微鏡下很容易區(qū)分鑒別出幼魚性別,建立了快速、簡便、準確的