利用OsPDCD5作為選擇標記與目的基因共轉化法構建無標記轉基因水稻.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、水稻是我國乃至世界上最重要的糧食作物之一，保障水稻生產對確保我國糧食安全和農業(yè)可持續(xù)發(fā)展有十分重要的戰(zhàn)略意義。發(fā)現和克隆水稻中具有重要功能性狀的基因，并通過轉基因等分子育種途徑應用這些基因，可加速水稻育種進程，取得水稻育種和生產的新突破。OsPDCD5和LRK1基因是復旦大學遺傳與育種實驗室在水稻中定位克隆的兩個基因。OsPDCD5是一程序性死亡基因，在表達載體pCAMIBIA1304（簡稱pC1304）中插入OsPDCD5，并用Osh

2、sp16.9啟動子代替CaMV35S啟動子，獲得熱激程序死亡基因的表達載體pC1304-Oshsp16.9-OsPDCD5，利用該載體與目的基因共轉化后重組，在42℃熱激處理下含有選擇標記OsPDCD5的植株發(fā)生萎蔫、死亡，可獲得無標記的轉目的基因水稻。將OsPDCD5的反義序列anti-OsPDCD5轉入水稻，可提高水稻耐鹽性。LRK1是富亮氨酸重復類受體蛋白激酶基因，轉LRK1基因水稻的露白要比非轉化的早，最終獲得的植株分蘗數、每穗

3、粒數和千粒重均有所增加。本試驗利用基因槍法，將構建的表達載體pC1304-Oshsp16.9-OsPDCD5分別與目的基因anti-OsPDCD5、LRK1共轉化秈稻品種9311，經抗性篩選和轉基因鑒定，獲得轉anti-OsPDCD5陽性植株5株，轉LRK1陽性植株8株。陽性植株自交分離的T1代在42℃下熱激處理，最終獲得無選擇標記的轉anti-OsPDCD5水稻植株2株，轉LRK1水稻植株3株。實驗結果證實了利用表達載體pC1304-

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