已閱讀1頁，還剩67頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀
版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領
文檔簡介
1、農桿菌介導的轉化法是小麥轉基因的主要方法之一。為了提高在小麥中農桿菌轉化法的效率，我們研究了四種添加物（乙酰丁香酮(Acetosyringone),L-半胱氨酸(L-cysteine),毒莠定(Picloram)和CuSO4）對農桿菌轉化的影響。實驗中使用的農桿菌菌株是AGL1，內含雙元質粒pAL154/pAL156;選取的品種為四倍體硬粒小麥Stewart，使用的受體材料是小麥幼胚。小麥經(jīng)過農桿菌轉化后獲得了轉基因植株，我們使用PCR
2、法共檢測出轉基因植株213株，GUS染色檢測得到GUS表達的植株163株。Southern檢測結果表明轉基因后代中外源基因單拷貝和多拷貝均有存在。對轉基因T1代進行分離比檢測，結果表明，大約30％株系分離比為3:1，符合單拷貝或者單表達的分離比，其余株系也大多符合多拷貝分離比。
研究結果表明：
1）在侵染培養(yǎng)基和共培養(yǎng)培養(yǎng)基中加入乙酰丁香酮和L-半胱氨酸可以使農桿菌侵染率提高，并且使愈傷組織的褐化率下降；
3、2）在共培養(yǎng)培養(yǎng)基和誘導愈傷培養(yǎng)基中加入毒莠定可以使誘導愈傷率提高；
3）在誘導愈傷培養(yǎng)基和再生培養(yǎng)基中加入CuSO4可以使再生率提高。最終影響到轉化率，使平均轉化率從2.8%提升到6.3%，而轉化率最高的株系轉化率可達12.3%。從實驗結果得到最佳的添加物濃度組合為：乙酰丁香酮為400μM，L-半胱氨酸為400 mg/L，毒莠定為10 mg/L，CuSO4為50 mM。本研究構建了一個成熟高效的農桿菌轉化體系，可以為農桿菌介
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 小麥農桿菌介導不同遺傳轉化體系的建立及比較研究.pdf
- 小麥幼胚農桿菌轉化體系優(yōu)化.pdf
- 小麥不同外植體農桿菌轉化體系研究.pdf
- 農桿菌介導的小麥成熟胚轉化體系的優(yōu)化及TaATG8的遺傳轉化.pdf
- 農桿菌介導大豆遺傳轉化體系的優(yōu)化研究.pdf
- 農桿菌介導小麥成熟胚遺傳轉化體系建立和遺傳轉化研究.pdf
- 農桿菌介導的花生遺傳轉化體系的優(yōu)化研究.pdf
- 小麥胚源再生轉化體系的建立.pdf
- 農桿菌介導家稗丙酮酸磷酸二激酶（PPDK）基因小麥轉化體系優(yōu)化的研究.pdf
- 農桿菌介導小麥成熟胚遺傳轉化體系的建立及轉抗蟲基因小麥分析.pdf
- 農桿菌介導的玉米轉化體系的優(yōu)化與抗蚜蟲基因的轉化研究.pdf
- 大豆農桿菌介導轉化體系的優(yōu)化及Sporamin和Chitinase KDEL基因轉化研究.pdf
- 33163.農桿菌介導的苜蓿遺傳轉化體系的建立與優(yōu)化
- 農桿菌介導的香菇遺傳轉化體系構建.pdf
- 農桿菌介導茄子遺傳轉化體系研究.pdf
- 樟樹遺傳轉化體系的優(yōu)化及抗寒基因的轉化.pdf
- 農桿菌介導的白三葉遺傳轉化體系的建立及優(yōu)化.pdf
- 甜瓜高效再生體系、轉化體系的建立與優(yōu)化.pdf
- 農桿菌介導的西瓜遺傳轉化體系的研究.pdf
- 菊花高頻再生體系建立及根癌農桿菌介導遺傳轉化體系的優(yōu)化.pdf
評論
0/150
提交評論