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文檔簡介
1、植物在經(jīng)歷低溫馴化時,為了提高其抗寒能力,體內常常積累大量的可溶性糖。“茶農98”品種樹型介于灌木與小喬木之間,屬于中葉偏大類,樹姿直立,分枝上斜,葉形長橢圓,葉尖銳尖,葉色黃綠?!坝逼贩N屬于小喬木型中葉類,植株較高大,樹姿直立,分枝密度中等,葉片橢圓形,芽葉黃綠色。
本實驗以這兩種茶樹品種為實驗材料,選取了低溫下茶樹糖代謝相關的蔗糖磷酸合成酶(CsSPS)、海藻糖-6-磷酸合成酶(CsTPS)和a-葡萄糖苷酶(Csa
2、-Glucosidase)這三個關鍵基因為研究對象。利用實時熒光定量PCR技術,測定了茶樹不同器官間、低溫脅迫處理不同時間段及不同部位問基因的表達水平,以此來研究低溫對茶樹糖代謝調控的分子機制,為進一步揭示茶樹的抗寒機制提供新的研究思路。同時,利用RACE技術對茶樹CsTPS和Csa-Glucosidase進行了全長克隆及生物信息學分析,以期發(fā)現(xiàn)這兩種基因在茶樹中同在其它物種中的聯(lián)系及區(qū)別,為解釋基因功能提供一定的理論依據(jù)。
3、 研究發(fā)現(xiàn)茶樹中與糖代謝相關的這三個基因在不同器官中均呈現(xiàn)出差異性表達,其中CsSPS和CsTPS在受低溫脅迫時,“茶農98”和“迎霜”兩個品種中的不同部位間表現(xiàn)出一致的變化趨勢,表達量均在12h最大,只是CsSPS的上調時間早于CsTPS。但是,Csa-Glucosidase在受低溫脅迫時,只是在“迎霜”品種中的不同部位表現(xiàn)出上調,而在“茶農98”品種中一直是下調的。
另外,克隆出3125bp的CsTPS的cDNA全長
4、序列,編碼932個氨基酸,具有TPS和TPP兩個保守的結構域,缺乏磷酸盒,屬于TPSⅡ亞家族??寺〕?915bp的Csa-Glucosidase的cDNA全長序列,編碼924個氨基酸,具有Glycohydro31的保守結構域,儀含有Asp(224)的序列基元,屬于a-GlucosidaseⅡ型。這兩個基因均與被子植物門雙子葉植物綱植物親緣關系較近。
綜合以上實驗結果可知,CsSPS和CsTPS比Csa-Glucosidas
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