噬菌弧菌H2的分離鑒定及其急性毒性研究.pdf

1、蛭弧菌類生物(Bdellovibrio-and-like organisms,BALOS)是一種專門以捕食細(xì)菌為生的寄生性細(xì)菌,在自然界中分布及其廣泛,能夠在較短的時(shí)間內(nèi)裂解弧菌、氣單胞菌、假單胞菌、沙門氏菌、志賀氏菌等常見病原菌,將其限制在較低的數(shù)量水平,同時(shí)又可以有效地控制水體中的氨氮、亞硝酸鹽、硫化物等有毒有害物質(zhì)。因此,利用蛭弧菌類生物作為水產(chǎn)養(yǎng)殖中的天然生物凈化因子具有廣闊的發(fā)展前景。鑒此,本文在概括了國(guó)內(nèi)外水產(chǎn)用蛭弧菌類生物

2、研究現(xiàn)狀的基礎(chǔ)上,剖析了我國(guó)在水產(chǎn)用蛭弧菌類生物研究中存在的問題,并對(duì)其在水產(chǎn)養(yǎng)殖中廣泛發(fā)展前景進(jìn)行了展望,以期推動(dòng)蛭弧菌類生物在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的發(fā)展進(jìn)程。
　　本文以霍亂弧菌作為宿主菌,從南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖水體中分離到一株具有噬菌特性的菌株H2,通過對(duì)其形態(tài)觀察、特異性PCR鑒定與系統(tǒng)發(fā)育分析,證實(shí)菌株H2為噬菌弧菌(Bacteriovorax sp.)(GenBank登錄號(hào):JX122409),其16S rRNA序列與GenBank基

3、因庫(kù)中噬菌弧菌屬菌株的16S rRNA序列有94％-98%的同源性,而且與噬菌弧菌菌株NE1(GenBank登錄號(hào):EF092445)的親緣關(guān)系最近。此外,菌株H2對(duì)溶藻弧菌、哈維氏弧菌、創(chuàng)傷弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌等其他病原菌也具有良好的裂解能力,在pH7.5、亞硝酸鹽氮濃度為0.2 mg/L時(shí)具有良好的裂解活性,在氨氮濃度≥0.2 mg/L時(shí)的裂解活性降低。本研究確定了噬菌弧菌H2的分類地位,分析了噬菌弧菌H2對(duì)常見弧菌的噬菌效果以

4、及不同水環(huán)境因子對(duì)其噬菌活性的影響,不僅豐富了弧菌寄生菌的微生物資源,而且為其在養(yǎng)殖水體弧菌消除中的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
　　實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)了分離的噬菌弧菌H2的環(huán)境安全性。方法:參照《GB/T13266-91水質(zhì)物質(zhì)對(duì)蚤類(大型蚤)急性毒性測(cè)定方法》、《漁藥臨床試驗(yàn)技術(shù)規(guī)范》等國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)及相關(guān)法規(guī)。觀察了噬菌弧菌H2對(duì)大型蚤、黃顙魚的急性毒性,分析了其對(duì)養(yǎng)殖水體主要理化因子的影響。結(jié)果顯示,噬菌弧菌H2在終濃度為0.2μL/L-2000μL