抗鐮刀菌芽孢桿菌的分離、篩選、鑒定及其抗菌機理初步研究.pdf

1、本研究針對長期以來困擾國內(nèi)外植物真菌性病害防治的突出問題，即防治效果、環(huán)境友好、食品安全和經(jīng)濟實用的矛盾，從自然仿生的角度和生物防治基本原理出發(fā)，設計和實施了從省內(nèi)不同地區(qū)和主要作物生長環(huán)境中廣泛取樣，并以危害普遍且嚴重的鐮刀菌病的常見病原菌為指示菌，通過一系列分離、篩選和鑒定工作，得到若干有價值的芽孢桿菌菌株，從中選出2株綜合抗病力表現(xiàn)優(yōu)良的芽孢桿菌strain5-1和strain36-3，并對其中1株(strain5-1)的抗病機理

2、進行了初步研究，為進一步的研究和利用打下良好的基礎。本研究主要得到了以下幾方面的結(jié)果:
　　 1在各種作物生長的內(nèi)外環(huán)境中普遍存在各種能夠抑制植物病原鐮刀菌的芽孢桿菌，通過適當?shù)姆蛛x篩選方法可以得到有應用前景的植物病原鐮刀菌生防芽孢菌株。
　　 2從土壤樣本中分離得到芽孢桿菌幾率遠高于從活體樣本分離的幾率，但從活體樣本篩得抗病原菌芽孢桿菌的幾率顯著高于土壤樣本的。
　　 3通過抑菌圈、抑菌率和抗菌譜試驗，并綜合這

3、幾方面的表現(xiàn)，可以篩選出抑菌效果顯著、抗菌譜廣的芽孢桿菌菌株。
　　 4復篩入選菌株strain5-1和strain36-3經(jīng)過形態(tài)學觀察、生理生化試驗，初步鑒定為地衣芽孢桿菌（B.licheniformis）和短小芽孢桿菌(B.pumilus)。16srDNA序列分析結(jié)果顯示，strain5-1與地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)處于同支相鄰，且相似性為100％;strain36-3與短小芽孢桿菌(B.pumilu

4、s)處于同支相鄰，且相似性為99％。此試驗結(jié)果與形態(tài)和生理生化試驗相一致。
　　 5菌株組合試驗結(jié)果表明，入選菌株strain5-1，strain36-3及其菌株組合的總抑菌力均高于對照Bacillussubtilis;菌株組合的總抑菌力又高于單菌株;但從對單一指示菌的抑菌力來看，排在前兩位的是單菌株strain5-1。
　　 6等濃度處理盆栽試驗結(jié)果表明，單菌株strain5-1處理組和菌株組合(strain5-1+s

5、train36-3)處理組對棉花枯萎病都具有顯著的防治效果，分別為30.8％和29.2％。菌株組合有一定互補優(yōu)勢效應。
　　 7strain5-1抑菌機理:①通過向細胞外分泌可溶性拮抗活性物質(zhì)是其主要抑菌方式。②抑菌物質(zhì)導致病原菌菌絲分支變短、粗縮、斷裂、消解和泡囊化現(xiàn)象，菌絲體正常生長受到阻礙，菌絲結(jié)構(gòu)遭到破壞。③抑菌活性物質(zhì)對100℃以上高溫敏感，對100℃以下尤其80℃以下的溫度有比較強的耐受性;拮抗活性物質(zhì)對酸堿度變化比