玉米根系蛋白磷酸酶ZmPP2C基因的克隆、表達特性及轉化的研究.pdf

1、山東農業(yè)大學碩士學位論文玉米根系蛋白磷酸酶ZmPP2C基因的克隆、表達特性及轉化的研究姓名：徐云峰申請學位級別：碩士專業(yè)：植物學指導教師：李德全20050602山東農業(yè)大學碩f ? 學位論文玉米根系蛋白磷酸酶Z m P P 2 C 基因的克隆、表達特性及轉化的研究2 0 0 5 屆植物學專業(yè)碩士研究生徐云峰指導教師李德全教授摘要本文以抗逆( 旱) 性較強的玉米品種L D 9 0 0 2 為試驗材料，采取溶液培養(yǎng)幼苗，信號調節(jié)物質、低溫和

2、干旱脅迫的處理方式，對玉米根系中的蛋白磷酸酶基因進行了分離克隆、表達特性及轉基因植株生理功能的研究。運用R T —P C R 方法，首次從玉米根系中分離到一個P P 2 C 基因的c D N A克隆，通過S o u t h e r n 雜交、N o r t h e r n 雜交、轉化等技術對該基因的組成情況、表達特性和生理功能進行了初步研究，旨在探討玉米等禾谷類作物抗逆的分子機制，為改良農作物抗逆性提供理論依據(jù)，主要結果如下：1 ． 依

3、據(jù)植物蛋白磷酸酶2 C ( p r o t e i np h o s p h a t a s e2 C ，P P 2 C ) 基因的保守區(qū)設計簡并引物，運用R T - P C R 方法，從玉米根系中分離出一個長度為9 3 6 b p 的P P 2 F 基因的c D N A 克隆，命名為Z m P P 2 G G e n B a n k注冊號為A Y 6 2 1 0 6 6 。2 ． 提取正常生長狀態(tài)下的玉米基因組D N A ，用B a

4、m H I ，E c o R V ，S a c I 三種限制性內切酶對玉米基因組D N A 進行完全酶切，以歷臌基因5’端為模板合成探針進行S o u t h e r n 雜交。結果表明：Z m P P 2 C 基因在玉米基因組中可能是兩個拷貝，弱帶可能是其他同源基因，在玉米中存在一個小的P P 2 C 基因家族。3 。 提取玉米根莖時的總R N A ，以Q 一“P —d C T P 標記的Z 皿P P 2 C 基因5 7 端為探針進行