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文檔簡介
1、第一部分血管緊張素Ⅱ對THP-1源性巨噬細胞膽固醇含量的影響 目的:將THP-1單核細胞株誘導為巨噬細胞,以THP-1源性巨噬細胞為研究對象,探討血管緊張素Ⅱ(AngiotensinⅡ,AngⅡ)對THP-1源性巨噬細胞內膽固醇含量的影響。 方法:用PMA將人源單核細胞株THP-1誘導分化為巨噬細胞,以50mg/L的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)溫孵育巨噬細胞48小時,同時分別加入不同濃度的AngⅡ及厄貝沙坦(Irbe
2、sartan,Irb);采用酶法,通過HITACHI650-60型熒光分光光度計,以325nm為激發(fā)光波長,415nm為熒光發(fā)射波長,檢測細胞內、外膽固醇含量的變化。 結果:AngⅡ能引起THP-1源性巨噬細胞內膽固醇含量顯著增高(p<0.05)、并成濃度依賴性;AngⅡ受體拮抗劑Irb能顯著減少細胞內膽固醇含量(p<0.05)。 結論:AngⅡ可引起THP-1源性巨噬細胞內膽固醇含量顯著增高,促進泡沫細胞形成,加速動脈
3、粥樣硬化。 第二部分血管緊張素Ⅱ對THP-1源性巨噬細胞ATP結合盒轉運子A1表達的影響 目的:將THP-1單核細胞株誘導為巨噬細胞,建立細胞模型作為研究對象,探討血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)對THP-1源性巨噬細胞ABCA1的表達調控作用。 方法:用PMA將人源單核細胞株THP-1誘導分化為巨噬細胞,以50mg/L的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)溫孵育巨噬細胞48小時,同時分別加入不同濃
4、度的AngⅡ及Irb;運用逆轉錄-多聚酶鏈反應(RT-PCR)和Westernblot分別檢測ABCA1mRNA與ABCA1蛋白的表達的變化。 結果:實驗顯示,不同濃度的AngⅡ(10-7、10-6、10-5mol/L)引起ABCA1表達的變化,與對照組及組間相比,均有較顯著差異,并成濃度依賴性。RT-PCR結果顯示,與對照組相比,mRNA表達分別下降(10.5±1.9)%、(22.6±5.3)%、(44±3.7)%,Weste
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