膽紅素對新生兒臍血單核細胞凋亡、吞噬功能和表面分子CD14CD86 、HLA－DR的影響.pdf

1、瀘州醫(yī)學院碩士學位論文膽紅素對新生兒臍血單核細胞凋亡、吞噬功能和表面分子CD14CD86、HLA－DR的影響姓名：牛會琴申請學位級別：碩士專業(yè)：兒科學指導教師：陳昌輝200704013膽紅素對新生兒臍血單核細胞凋亡、吞噬功能和表面分子CD14CD86、HLA－DR的影響摘要目的：分離新生兒臍血單核細胞，經(jīng)不同濃度膽紅素處理，再給予脂多糖刺激，探討膽紅素對細胞凋亡率、細胞表面分子表達率和細胞吞噬功能的影響以及三者之間的關系。方法：1單核細

2、胞的分離鑒定，以正常足月新生兒為研究對象，收集臍靜脈血，采用纖維連接蛋白結(jié)合法分離臍血單核細胞。流式細胞儀檢測細胞純度，臺盼蘭檢測其活力。2膽紅素孵育單核細胞，將上述分離的單核細胞分別置于含有不同濃度膽紅素（0mgdl、6mgdl、9mgdl、12.9mgdl、18mgdl）的牛血清白蛋白溶液中孵育1h，倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)學變化。3脂多糖刺激培養(yǎng)細胞，經(jīng)膽紅素孵育后，給予脂多糖（LPS，1ugml）刺激48小時，收集細胞。采用TU

3、NEL法檢測細胞凋亡率，雙色免疫熒光抗體標記流式細胞儀技術檢測細胞表面分子的表達和熒光標記的葡聚糖吞噬試驗檢測細胞的吞噬功能。結(jié)果：①分離細胞后，流式細胞儀檢測CD14陽性細胞率為（93.992.48）%，0.4%臺盼蘭檢測細胞活性為（92.612.39）%。②倒置顯微鏡下觀測細胞，對照組細胞形態(tài)正常，膽紅素組細胞發(fā)生鋸齒樣變，細胞被黃染易發(fā)生聚集，在膽紅素為6mgdl時已經(jīng)存在，且隨濃度的增加，越明顯。③膽紅素作用后檢測細胞凋亡率結(jié)果