二色補(bǔ)血草總黃酮研究.pdf

1、目的：通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選出二色補(bǔ)血草總黃酮的最佳提取工藝，建立大孔吸附樹(shù)脂分離純化二色補(bǔ)血草總黃酮的實(shí)驗(yàn)方法，并建立總黃酮的含量測(cè)定方法。初步確定了二色補(bǔ)血草總黃酮標(biāo)準(zhǔn)提取物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。最后對(duì)二色補(bǔ)血草總黃酮和二色補(bǔ)血草水煎劑進(jìn)行了出凝血實(shí)驗(yàn)和對(duì)性激素影響實(shí)驗(yàn)的比較。 方法：以蘆丁為對(duì)照品，采用鋁鹽絡(luò)合比色法，用UV-1100分光光度計(jì)確定二色補(bǔ)血草總黃酮含量測(cè)定方法。采用L9(43)正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，以總黃酮含量為指標(biāo)，考察乙醇用量，

2、回流時(shí)間，回流次數(shù)，乙醇濃度四個(gè)因素對(duì)二色補(bǔ)血草總黃酮提取率的影響，確定最佳提取工藝。考察D-101大孔吸附樹(shù)脂對(duì)二色補(bǔ)血草總黃酮的吸附和洗脫條件，確定了總黃酮的分離純化工藝。初步建立了二色補(bǔ)血草總黃酮標(biāo)準(zhǔn)提取物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。采用水煎劑大中小劑量，總黃酮大中小劑量和生理鹽水共7組對(duì)比了對(duì)小鼠出凝血時(shí)間的影響，將去勢(shì)雌性大鼠分成陰性對(duì)照組(生理鹽水)，陽(yáng)性對(duì)照組(宮血寧)，總黃酮組，水煎液大，中，小劑量組，以促卵泡素(FSH)、促黃體素(L

3、H)、雌二醇(E2)、孕酮(P)的變化為指標(biāo)，考察了總黃酮和水煎液對(duì)促卵泡素(FSH)、促黃體素(LH)、雌二醇(E2)、孕酮(P)的影響。 結(jié)果：應(yīng)用比色法建立了二色補(bǔ)血草總黃酮含量測(cè)定的實(shí)驗(yàn)條件，得到回歸直線(xiàn)方程為y=1.366680x-0.009568，r=0.9999。y為吸光度，x為蘆丁濃度(mg/ml)。線(xiàn)性范圍為：0.1025mg/ml～0.6150mg/ml。總黃酮最佳提取工藝為料液比為1:10，濃度為60％的乙