抑制老年大鼠中樞交感神經緊張性增加對心肌細胞收縮功能的影響及其機制初步探討.pdf

1、目的:交感神經緊張性隨著年齡的增加而增加，這會引起心血管系統(tǒng)的結構和功能發(fā)生改變。這些改變可能是促發(fā)老年人心血管疾病的危險因素。長期中樞交感神經緊張性增加可引起β-腎上腺素受體數(shù)目或敏感性的改變，最終導致心肌收縮功能下降。那么，如果抑制中樞交感神經的緊張性增加是否可改善老年大鼠的心臟收縮功能。本試驗觀察抑制中樞交感神經緊張性增加，對老年大鼠心臟收縮功能、β-腎上腺素受體數(shù)目和敏感性的影響；并進一步探討了體外轉染肌漿網鈣ATP酶基因對其心

2、肌細胞收縮功能的影響。 方法:老年SD大鼠，雌雄不拘，隨機分為老年可樂定組(可樂定，15ug/kg/d腹腔注射，連續(xù)2周)和生理鹽水對照組(以下簡稱老年組生理鹽水1ml/kg/d腹腔注射，連續(xù)2周)。另選成年SD大鼠，雌雄不拘，為成年組(生理鹽水腹腔注射1ml/kg/d，連續(xù)2周)。分別測定大鼠在體和離體心臟收縮功能。然后，酶法分離各組大鼠心肌細胞，測定不同濃度鈣離子和異丙。腎上腺素(ISO)刺激下細胞收縮功能變化和細胞存活率；

3、分別阻斷細胞上β1、β2-AR在同一濃度異丙腎上腺素刺激下觀察細胞收縮功能。收集各組心肌細胞，采用Western blot法測定β-ARs蛋白表達。最后，利用基因轉染技術將SERCA2a基因轉染入各組大鼠心肌細胞內，觀察細胞收縮功能變化。 結果: 1.成年組、老年組、老年可樂定組大鼠在體和離體心臟收縮功能有如下變化：老年對照組與成年組以及老年可樂定組之間心率、收縮壓、舒張壓和平均動脈壓無明顯變化；與成年組比較，老年對照組

4、左心室內壓變化速率(±dp/dt)下降，左心室舒張末壓(LVEDP)升高；老年可樂定組±dp/dt較老年對照組改善，LVEDP降低。各組間心肌細胞存活率無顯著性差異。 2.成年組、老年組、老年可樂定組大鼠心肌細胞的收縮幅度比較 (1)心肌細胞對不同濃度的鈣的刺激反應性：在一定范圍內(0.6～2.4mmol/L)隨著鈣離子濃度的升高，各組細胞的收縮幅度增加；成年組心肌細胞收縮幅度明顯大于老年組，略高于老年可樂定組；老年可樂

5、定組心肌細胞收縮幅度較老年對照組增加。 (2)心肌細胞對不同濃度異丙腎上腺素刺激收縮反應性：老年可樂定組大鼠心肌細胞隨著異丙腎上腺素濃度的升高(1×10-9～1×10-7mol/L)收縮幅度增加，且收縮幅度小于成年組但大于老年組。 3.分別用選擇性β1-AR阻斷劑CGP20712A和選擇性β2-AR阻斷劑ICI118,551阻斷細胞上相應受體發(fā)現(xiàn)：各組大鼠心肌細胞在同一濃度異丙腎上腺素刺激作用下引起的收縮反應均較正常對照

6、組明顯降低；單純阻斷β1-AR后老年可樂定組心肌細胞降低幅度最小；而單純阻斷β2-AR后老年可樂定組心肌細胞降低幅度較其它組更為明顯。各組心肌細胞蛋白含量測定表明：抑制交感緊張性增加對β1、β2-AR表達無明顯改變，選擇性的阻斷細胞上β1、β2-AR，各組心肌細胞間蛋白表達量仍無明顯的變化。 4.轉染SERCA2a基因的老年組心肌細胞收縮幅度較未轉染的老年組心肌細胞并沒有明顯改善，而老年可樂定組和成年組心肌細胞在轉入SERCA2

7、a基因后大鼠心肌細胞收縮幅度較未轉染前則明顯增加。 結論: 1.抑制中樞交感神經緊張性增加，可明顯改善老年大鼠在體、離體心臟以及單個心肌細胞的收縮功能。 2.抑制中樞交感神經緊張性增加，對成年組、老年組、老年可樂定組大鼠心肌細胞受體最的表達并無顯著改變，但心肌細胞的收縮功能發(fā)生明顯變化，這可能是通過β2-AR的敏感性增加引起的。 3.增加SERCA2a基因的表達對老年組心肌細胞收縮功能無明顯改善，但可改善