腦膠質瘤組織中解旋酶RECQ1表達與PCNA表達相關性分析.pdf

1、目的:人腦膠質瘤是最常見的顱內原發(fā)性腫瘤，手術難以根除，對放、化療不敏感，因此如何有效的控制甚至治愈膠質瘤仍是亟待解決的難題，文獻報道，WHO分級3級的膠質瘤患者平均生存期約3-5年，多形性膠質母細胞瘤患者平均生存期不足1年，尋找膠質瘤治療新靶點及調整治療策略，是我們當前亟待解決的難題。因此明確膠質瘤致病機理，進一步篩選高效特異性的治療靶點尤為重要。而隨著基因技術的不斷深入研究，如何能利用基因有效治療膠質瘤成為研究熱點。
　　解旋

2、酶是一類能解開核苷酸雙鏈的酶，它廣泛存在于多種生物體中，參與細胞內DNA復制、修復、轉錄重組以及RNA接拼、核糖體組裝、蛋白質翻譯，端粒穩(wěn)定。最近研究表明，解旋酶第二大家族中的RECQ解旋酶亞家族在核酸代謝過程中起關鍵作用。研究表明RECQ1對腫瘤細胞增殖作用主要與其能夠誘導腫瘤細胞DNA修復有關。
　　增殖細胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen，PCNA)在腦膠質細胞瘤組織中的表達能夠反

3、應膠質瘤惡性程度及膠質瘤細胞增殖能力，常用于膠質瘤患者預后評估。
　　探討解旋酶RECQ1在不同級別人腦膠質瘤中表達情況，對于腦膠質瘤發(fā)生進展過程中核酸代謝特點進行初步探討，明確PCNA對腦膠質瘤患者預后評估。對RECQ1和PCNA二者在膠質瘤細胞瘤增殖方面的內在聯系做出初步推測，為腦膠質瘤患者預后評估及進一步放、化療及基因治療奠定基礎。
　　方法:
　　1收集河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院神經外科及保定市第一醫(yī)院神經外科201

4、2年11月-2013年10月期間83例經手術中切除并獲的新鮮人腦膠質瘤組織及18例正常人腦組織，正常人腦組織取自急癥行顱腦外傷內減壓術患者。所取的腫瘤組織標本經兩名以上神經病理醫(yī)師進行診斷并確診。83例患者，包括男性47例，女性36例。其中低級別膠質瘤（WHO分級1-2級）35例，高級別膠質瘤（WHO分級3-4級）48例。腫瘤位于大腦半球74例，小腦4例，丘腦3例，第三腦室1例，腦干1例。單發(fā)80例，多發(fā)3例。所有患者術前均無未接受放、

5、化療和免疫治療史;標本取材后，生理鹽水去除血漬，首先將部分投至液氮中速凍，進行半定量PCR檢測，另一部分標本用10％甲醛固定，石蠟包埋，進行免疫組織化學染色。同時記錄患者性別、年齡，病理級別。
　　2應用免疫組織化學方法，對實驗組及對照組標本RECQ1和PCNA表達進行分析。
　　3同時對術中所取的新鮮膠質瘤組織運用液氮保存，應用逆轉錄聚合酶鏈反應(reverse transcription polymerase chine

6、 reaction，RT-PCR)方法檢測各組標本RECQ1 mRNA的表達。
　　4應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對數據進行分析，組間比較采取x2檢驗，相關性檢驗采用Spearman相關分析。
　　結果:
　　1 RECQ1免疫組織化學結果顯示:RECQ1蛋白著色于膠質瘤細胞細胞核。所有級別膠質瘤組織中的陽性表達率為56.6％(47/83)，對照組18例正常腦組織中RECQ1均呈陰性表達，在高級別膠質瘤組陽性表達率72

7、.9％(35/48)，而在低級別膠質瘤組其陽性表達率為34.3％(12/35)，高級別膠質瘤組RECQ1表達高于低級別腦膠質瘤組，具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　2 PCNA免疫組織化學結果顯示，陽性表達位于細胞核，在膠質細胞瘤中的陽性表達率為80.7％(67/83)，并且隨膠質細胞瘤病理級別的增高而表達增高，而在正常腦組織中呈陰性表達。
　　3半定量-PCR研究結果:RECQ1 mRNA在正常腦組織、低級別膠質瘤組及

8、高級別膠質瘤組中相對表達量分別為0.37±0.02，1.05±0.08和2.22±0.14，RECQ1在高級別腦膠質瘤組織中的表達高于低級別腦膠質瘤，二者均高于正常腦組織中表達，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　結論:
　　1高級別腦膠質瘤組織中RECQ1表達高于低級別腦膠質瘤組，在正常腦組織中不表達。
　　2 RECQ1 mRNA在高級別腦膠質瘤組織中含量高于低級別腦膠質瘤組，在正常腦組織中呈低表達。